吡格列酮對2型糖尿病大鼠腎臟雷帕霉素靶蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：①觀察糖尿病組及吡格列酮干亟組大鼠空腹血糖、胰島素、甘油三酯、膽固醇、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐的變化。②探討PPAR-γ激動劑吡格列酮對糖尿病大鼠腎臟mTOR表達(dá)的影響。
　　 方法：體質(zhì)量為(200±20)g的8周齡健康清潔級SD雄性大鼠33只，隨機(jī)分成2組，正常對照組(A組)11只，糖尿病模型組22只。A組給予正常普通飲食，糖尿病模型組給予高糖高脂飲食造模，喂養(yǎng)4周，按照HOMA胰島素抵抗指數(shù)[HOMA=(FPG×F

2、NS)/22.5]判斷動物出現(xiàn)胰島素抵抗，本實(shí)驗(yàn)HOMA統(tǒng)計結(jié)果為(16.3±2.74)mmol·mU/L2，將鏈脲佐菌素(STZ)按30mg/kg體質(zhì)量一次性腹腔注射，正常對照組腹腔內(nèi)注射等體積檸檬酸緩沖液。1周后，尾靜脈采血，血糖儀測定空腹血糖(采血前大鼠禁食12h)，以空腹血糖≥13.9 mmol/L作為糖尿病造模成功標(biāo)準(zhǔn)。將造模成功的糖尿病大鼠隨機(jī)分成2組，即糖尿病模型組B組、吡咯列酮干預(yù)組C組，A、B組給予生理鹽水灌胃(2ml

3、/kg.d)，C組給予吡格列酮(10mg/kg.d)灌胃給藥，飼養(yǎng)6周。大鼠自實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一日收集24小時尿標(biāo)本，用于測定尿微量白蛋白；最后處死大鼠采血，用于測定血糖、血胰島素、膽固醇、甘油三脂、尿素氮、肌酐；摘取腎臟，一個腎用4％中性多聚甲醛固定，行HE染色行形態(tài)學(xué)檢查及免疫組化觀察mTOR蛋白水平的變化；另一個腎組織保存于-80℃冰箱，用于測定mTOR mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴各組大鼠實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)：與A組比較，B、C組大

4、鼠FBG、FNS、HOMA-IR、TG、TC水平均明顯升高(P<0.05)，與B組比較，C組大鼠FBG、FNS、HOMA-IR、TG、TC水平均明顯降低(P<0.05)。⑵腎功能：各組大鼠BUN、Cr、UAlb比較：與A組比較，B、C組大鼠BUN、UAlb升高(P<0.01)，B組Cr升高(P<0.05)，A、C組Cr水平無明顯差異，與B組比較，C組大鼠BUN、Cr、UAlb降低(P<0.05)。⑶HE染色：A組大鼠腎組織病理結(jié)構(gòu)基本正

5、常，B組大鼠腎小管上皮細(xì)胞可見玻璃樣變和無結(jié)構(gòu)紅染物質(zhì)，局灶區(qū)域可見腎小管液化壞死，腎小球囊內(nèi)可見少量紅細(xì)胞滲出，腎小球基底膜增厚，細(xì)胞外基質(zhì)增多，C組較B組病變減輕。⑷免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：各組大鼠在腎小管、腎小球中均可見mTOR表達(dá)呈棕色顆粒樣物，與A組比較，B、C組大鼠腎組織mTOR表達(dá)明顯升高(P<0.01)；與B組比較，C組大鼠腎組織mTOR表達(dá)明顯降低(P<0.05)。⑸基因表達(dá)：與A組比較，B、C組大鼠腎組織mTORmRN

6、A表達(dá)強(qiáng)度增強(qiáng)(P<0.05)；與B組比較，C組大鼠腎組織mTOR mRNA表達(dá)強(qiáng)度減弱(P<0.05)。⑹尿微量白蛋白與mTOR的表達(dá)密切相關(guān)，r=0.71(P<0.01)。
　　 結(jié)論：①糖尿病組大鼠空腹血糖、胰島素、甘油三酯、膽固醇、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐水平增加，吡格列酮干預(yù)后能降低各項(xiàng)生化指標(biāo)(肌酐除外)。②糖尿病組大鼠腎臟組織mTOR表達(dá)比正常組表達(dá)增強(qiáng)，吡格列酮干預(yù)后，腎臟組織mTOR的表達(dá)減弱。③吡格列酮能改