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文檔簡介
1、水稻是世界重要的糧食作物,也是重要的單子葉模式植物。每年由蟲害引起的水稻產(chǎn)量損失達20%,嚴(yán)重威脅我國的水稻產(chǎn)量。本文以水稻及其害蟲——二化螟(Chilo suppressalia)與褐飛虱(Nilaparvata lugens St(a)l)為研究系統(tǒng),應(yīng)用分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、昆蟲行為學(xué)等分析方法,通過構(gòu)建OsRCI-1基因過量表達及RNAi抑制功能缺損突變體,從反向遺傳學(xué)角度,研究水稻脂氧合酶基因OsRCI-1在水稻蟲害誘導(dǎo)防御反應(yīng)
2、中的作用機理。主要結(jié)果如下:
(1)水稻脂氧合酶基因OsRCI-1是蟲害信號后期應(yīng)答基因:處理組與對照組相比,二化螟(striped stem borer,SSB)取食2h內(nèi)水稻中OsRCI-1表達豐度彼此間沒有差異;取食4-24h后,SSB處理水稻中OsRCI-1基因的mRNA水平顯著積累;
(2) OsRCI-1基因參與水稻內(nèi)源茉莉酸(jasmonates,JA)和綠葉性氣味(green leaves volat
3、iles,GLVs)合成:SSB取食危害后3h時,OsRCI-1基因RNAi抑制品系的JA含量總體都比野生型高;過量表達OsRCI-1品系釋放的GLVs(特別是cis-3-hexenal)明顯高于同樣處理的野生型水稻的釋放量;
(3) OsRCI-1基因參與水稻對咀嚼式口器昆蟲(SSB)的誘導(dǎo)防御反應(yīng):生測結(jié)果表明,在RNAi抑制品系或過量表達OsRCI-1水稻取食的二化螟體重都顯著大于以野生型WT為食的SSB體重;RNAi抑
4、制OsRCI-1降低了水稻對SSB的抗性,與RNAi抑制水稻品系體內(nèi)胰蛋白酶抑制劑(trypsin proteinase inhibitors,TrypPIs)含量顯著降低有關(guān)。
(4) OsRCI-1正調(diào)控水稻對刺吸式口器昆蟲(褐飛虱)的誘導(dǎo)防御反應(yīng):取食和產(chǎn)卵選擇性實驗表明,褐飛虱(brown planthopper,BPH)雌成蟲顯著趨向于在野生型XS11上取食和產(chǎn)卵;取食過量表達OsRCI-1基因水稻突變體的BPH雌若
5、蟲發(fā)育歷期顯著延長、初孵成蟲(雌、雄)體重顯著降低。此外,單雌產(chǎn)卵量也顯著減少。田間試驗表明,過量表達OsRCI-1基因水稻突變體BPH卵的寄生率顯著高于野生型上卵的寄生率。
(5) OsRCI-1在水稻不同品種中存在遺傳多態(tài)性:利用RT-PCR克隆了TN1、Mudgo、IR26等水稻品種的OsRCI-1全編碼序列,多序列聯(lián)配等生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)抗褐飛虱水稻品種(含Bph1)OsRCI-1的基因型為都為PRRHAAV型,而感蟲
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