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文檔簡介
1、褐飛虱Nilaparvata lugens(Stal)是我國最主要的水稻害蟲,嚴重影響水稻產(chǎn)量。褐飛虱將卵產(chǎn)在水稻的葉鞘組織內(nèi),產(chǎn)卵器不僅傷害了水稻組織,而且將卵留在水稻組織內(nèi),導致水稻產(chǎn)生一系列的防御反應。本文以褐飛虱產(chǎn)卵刺激為切入點,利用氣相色譜(GC),熒光定量PCR以及cDNA—AFLP技術(shù)從水稻防御基因表達,物質(zhì)含量變化,以及防御途徑的激活等幾個方面進行研究,以期深入了解究褐飛虱產(chǎn)卵誘導的水稻防御反應。 1)褐飛虱產(chǎn)卵
2、誘導水稻防御相關(guān)基因的表達 褐飛虱產(chǎn)卵為害啟動了包括水楊酸(SA)、一氧化氮(NO),乙烯(ET)和過氧化氫(H2O2)等在內(nèi)的水稻信號物質(zhì)合成途徑,誘導了水楊酸合成關(guān)鍵酶(PAL),NO合成關(guān)鍵酶(NR),乙烯合成酶(AO),H2O2合成關(guān)鍵酶(POX)的上調(diào)表達。但是不啟動茉莉酸合成途徑,其對茉莉酸合成途徑的第一個關(guān)鍵酶(LOX)及茉莉酸合成關(guān)鍵酶(AOS)的表達無誘導表達作用。 褐飛虱產(chǎn)卵為害啟動了萜烯類揮發(fā)物的合
3、成途徑,誘導萜烯類物質(zhì)倍半萜合成關(guān)鍵酶(FPS),單萜合成酶(GDS)和二萜合成酶(GGDS)等基因的表達,同時,飛虱產(chǎn)卵為害能誘導水稻直接防御相關(guān)物質(zhì)蛋白酶抑制劑以及病程相關(guān)蛋白的關(guān)鍵合成基因表達量的上升。 2)褐飛虱產(chǎn)卵誘導水稻防御相關(guān)物質(zhì)含量的增加 褐飛虱產(chǎn)卵處理對水稻一氧化氮(NO)信號傳導物質(zhì)及直接防御物質(zhì)有誘導作用。水稻蛋白酶抑制劑(PI)的含量和一氧化氮(NO)的含量都呈先上升后下降的趨勢。蛋白酶抑制劑(P
4、I)與一氧化氮(NO)的含量都在產(chǎn)卵處理后12h達最大值,與對照差異顯著,隨后逐漸下降;產(chǎn)卵處理誘導的PI的含量最大值低于取食處理的誘導量而產(chǎn)卵與取食處理誘導的一氧化氮。與取食危害相似,褐飛虱產(chǎn)卵為對水稻的揮發(fā)物有的誘導作用。 4)褐飛虱產(chǎn)卵為害激活水稻的不同防御途徑 利用cDNA—AFLP技術(shù)篩選對照與褐飛虱產(chǎn)卵處理水稻植株中的差異基因片段,共得到21個差異片段,經(jīng)初步分析鑒定了其中的16個:10個屬于水稻不同信號傳導
5、途徑基因,3個屬于看家基因,3個屬于維持細胞功能的基因。 褐飛虱產(chǎn)卵為害對水稻的防御途徑有誘導作用,能誘導相關(guān)防御基因的上調(diào)表達,刺激水稻釋放防御相關(guān)的揮發(fā)性物質(zhì)以及影響防御物質(zhì)的含量,并且很有可能是激活水稻的水楊酸途徑。但是,褐飛虱產(chǎn)卵與取食對防御基因及防御物質(zhì)含量的誘導作用存在差異:產(chǎn)卵處理對各防御基因的誘導作用弱于取食處理,并且產(chǎn)卵處理對防御物質(zhì)含量的誘導要晚于取食處理。以上研究結(jié)果不僅為研究水稻應對褐飛虱產(chǎn)卵為害的分子反
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