2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、該試驗(yàn)為了細(xì)致研究SV40T致瘤過(guò)程中Rb、p53基因的具體作用,構(gòu)建了兩種含有SV40T不同區(qū)段的外源基因:Rb結(jié)合域點(diǎn)突變的SV40T基因(SV40T-DRb)和無(wú)p53結(jié)合域的SV40T基因(SV40T-Dp53).建立這兩種基因的轉(zhuǎn)基因小鼠,為探討SV40T致瘤過(guò)程中p53和Rb的作用提供工具.試驗(yàn)成果如下:1.利用分子生物學(xué)的基因克隆手段,將改造的SV40T基因片段克隆測(cè)序.SV40T-DRb基因的測(cè)序結(jié)果表明,在位于Rb結(jié)合

2、域中的第109位氨基酸發(fā)生了突變(E→V),其它氨基酸則無(wú)變化.SV40-Dp53基因的測(cè)序結(jié)果表明,與正常基因核苷酸對(duì)比的同源性達(dá)98％.2.將測(cè)序后的SV40T-DRb基因和SV40T-Dp53基因克隆進(jìn)乳腺特異性表達(dá)載體p205C3中,運(yùn)用雄原核顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠.先后共計(jì)注射862枚小鼠受精卵,移植360枚注射后存活的小鼠受精卵,使用35只假孕受體母鼠,有23只受孕,共出生127只小鼠.3.轉(zhuǎn)基因小鼠出生后,用PCR方法檢

3、測(cè)出6只雙陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因(同時(shí)檢測(cè)到SV40T-DRb和SV40T-Dp53兩種基因)小鼠,為了避免PCR技術(shù)造成的假陽(yáng)性,用Southern blot方法檢測(cè)出1只雙陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因小鼠(♂).4.F<,0>代轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖交配后,獲得25只F<,1>代小鼠,經(jīng)PCR檢測(cè)證明轉(zhuǎn)基因攜帶率為50％(16/25),符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律,證明外源基因可穩(wěn)定地傳至后代.試驗(yàn)結(jié)果證明該試驗(yàn)構(gòu)建的兩種轉(zhuǎn)SV40T不同區(qū)段的策略是成功的,其建立的陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因小鼠

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