博吉亞椰子植原體媒介昆蟲的初步鑒定.pdf

1、植原體是引起許多重要作物病害，由介體昆蟲傳播的柔膜菌綱病原體。篩選確定植原體的介體昆蟲對于病害的防控和綜合治理是非常重要的，但在試驗方法和試驗進度上也非常具有挑戰(zhàn)性，特別是對比較高大的棕櫚科的植物。因為需要大量的昆蟲和健康的供試植株，在時間上也往往需要持續(xù)數(shù)月甚至更久。僅僅檢測昆蟲體內(nèi)是否含有植原體 DNA，不能作為判斷昆蟲為其介體的依據(jù)，要確認昆蟲為介體，植原體需要克服昆蟲腸道和唾液腺的障礙和定殖，然后隨著昆蟲的取食能夠傳播植原體到寄

2、主植物。一個相當于傳播試驗的相對新的方法通過用分子技術(shù)檢測昆蟲取食過后的蔗糖溶液中的植原體DNA發(fā)展起來。本研究結(jié)合人工蔗糖飼養(yǎng)液法和環(huán)介導(dǎo)等溫擴增法（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）試驗，檢測了大洋洲巴布亞新幾內(nèi)亞（Papua New Guinea）的博吉亞椰子病害（Bogia coconut syndrome，BCS）區(qū)域的半翅目11個昆蟲分類種的627個樣本。通過LAMP法檢

3、測有6種昆蟲的頭部組織和昆蟲取食過的蔗糖飼養(yǎng)液中的植原體DNA都為陽性結(jié)果的樣本，它們屬于四個科：袖蠟蟬科（Derbidae）、璐蠟蟬科（Lophopidae）、蛾蠟蟬科（Flatidae）和廣翅蠟蟬科（Ricaniidae）。還有兩種昆蟲的檢測結(jié)果只在頭部組織中為陽性，余下三種昆蟲的檢測結(jié)果全部為陰性。通過巢式PCR驗證陽性樣本并測序，序列結(jié)果顯示只有一種植原體序列，且在GenBank中BLAST顯示該序列和植原體16SrIV組的'C