Rho-ROCK通路在野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動脈高壓中的作用及法舒地爾的干預(yù).pdf

1、目的： 建立野百合堿誘導(dǎo)的大鼠肺動脈高壓模型，探討Rho/ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肺動脈高壓發(fā)病機制中的作用，觀察法舒地爾對該模型肺動脈高壓的預(yù)防及治療作用。 方法： 采用一次性皮下注射1％野百合堿(MCT)50mg/Kg建立SD大鼠肺動脈高壓模型；84只SD雄性大鼠隨機分為：(1)預(yù)防組：正常4周組(N4)、模型4周組(M4)、地爾硫卓4周組(D4)、法舒地爾4周組(F4)；(2)治療組：正常8周組(N8)、模型

2、8周組(M8)、地爾硫卓8周組(D8)、法舒地爾8周組(F8)。D4組、F4組于造模第3天開始分別予地爾硫卓(0.5mg/kg.d)、法舒地爾(15mg/kg.d)干預(yù)4周；D8組、F8組于造模第4周末開始分別予地爾硫卓(0.5mg/kg.d)、法舒地爾(15mg/kg.d)干預(yù)4周。各組干預(yù)結(jié)束后經(jīng)心導(dǎo)管法測量平均右心室壓力(mRVP)、平均肺動脈壓力(mPAP)和右心室肥厚指數(shù)[RV/(LV+S)]；HE染色觀察肺小動脈50-150

3、μm血管厚度與血管外徑之比(WT％)和管壁面積占血管總面積的百分比(WA％)；免疫組化方法檢測ROCK-1、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白在肺組織的表達；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測ROCK-1、eNOS、前內(nèi)皮素-1原(preproET-1)mRNA在肺組織的表達。 結(jié)果： (1)注射MCT4周后大鼠肺動脈高壓模型建立成功， M4組mRVP、mPAP、RV/(LV+S)顯著升高(P<0.01)，HE染

4、色顯示肺小動脈內(nèi)膜明顯增生，中膜明顯增厚，管腔狹窄，WT％、WA％顯著升高(P<0.01)，上述指標(biāo)隨時間進一步升高，M8組與M4組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。預(yù)防組中F4組、D4組mRVP、mPAP、RV/(LV+S)、WT％、WA％均較M4組下降(P<0.05)，但F4組下降更明顯，與D4組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。治療組結(jié)果與預(yù)防組類似。 (2)預(yù)防組中：N4組ROCK-1 mRNA和蛋白僅少量表達，

5、M4組表達顯著升高(P<0.01)；F4組ROCK-1 mRNA和蛋白表達較M4組下降(P<0.05)，但仍高于N4組(P<0.05)，D4組與M4組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療組結(jié)果與預(yù)防組類似。 (3)預(yù)防組中：N4組preproET-1mRNA少量表達，M4組表達顯著升高(P<0.01)；F4組較M4組表達顯著下降(P<0.01)，與N4組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；D4組表達與M4組比較差異無統(tǒng)計

6、學(xué)意義(P>0.05)。治療組結(jié)果與預(yù)防組類似。 (4)預(yù)防組中：N4組eNOS mRNA和蛋白大量表達，M4組表達顯著下降(P<0.01)；F4組eNOS mRNA表達較M4組升高(P<0.05)，D4組與M4組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療組結(jié)果與預(yù)防組類似。 (5)ROCK-1表達與preproET-1表達、mPAP、WT％和WA％呈顯著正相關(guān)(r=0.630、r=0.640、r=0.679、r=0.7

7、07，均P<0.01)，ROCK-1表達與eNOS表達呈顯著負相關(guān)(r=-0.815，P<0.01)。 結(jié)論： 法舒地爾能有效地降低肺動脈壓，抑制肺小動脈平滑肌的收縮、增生和肥厚，抑制肺小血管重構(gòu)和右心室肥厚，阻止野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓的形成或明顯緩解已經(jīng)形成的肺動脈高壓，提示Rho/ROCK信號通路在肺動脈高壓的發(fā)病機制中起重要作用，這些作用可能通過激活ROCK-1直接影響肺動脈平滑肌收縮、上調(diào)preproET-1表