乙酰半胱氨酸對野百合堿誘導大鼠肺動脈高壓的干預及機制研究.pdf

1、目的:建立野百合堿誘導的大鼠肺動脈高壓模型，探討激活素受體樣激酶1（activin receptor-like kinase1，ALK-1）信號轉導在肺動脈高壓發(fā)病機制中的作用，觀察N-乙酰半胱氨酸防治該模型肺動脈高壓的作用及可能機制。
　　方法:將32只健康雄性Wistar大鼠隨機分為正常對照組、肺動脈高壓模型組、乙酰半胱氨酸低劑量（100mg/kg/d）治療組、乙酰半胱氨酸高劑量（500mg/kg/d）治療組，每組8只。模型組

2、和治療組分別一次性腹部皮下注射野百合堿（60mg/Kg），治療組自注射野百合堿之日起分別用乙酰半胱氨酸100mg/kg/d、500mg/kg/d灌胃，對照組及模型組僅予等量生理鹽水灌胃，均每日一次，6周后達實驗終點。觀察各組大鼠的一般情況及生存率，各組干預結束后，測定大鼠平均肺動脈壓力（mPAP）,平均右心室壓力（mRVP），計算右心室肥大指數(shù)[RV/(LV+S)]，HE染色觀察肺小動脈結構變化，應用圖像分析系統(tǒng)測定肺動脈管壁厚度與血管

3、外徑百分比（WT％）、管壁面積與血管面積百分比（WA％）以及血管炎癥評分，以此反應肺血管重建情況；免疫組化染色方法檢測肺小動脈中ALK-1、Smad1的表達及肺動脈血管平滑肌細胞增殖細胞核抗原（PCNA）分布，TUNEL染色法檢測肺動脈血管平滑肌細胞的凋亡情況，分別計算其平均吸光度；Western Blotting技術檢測肺組織中ALK-1和Smad1蛋白的表達含量。
　　結果：1、存活情況：實驗6周末結束時對照組、模型組、低劑量

4、治療組、高劑量治療組各組存活率分別為100％、75％、88％、100％。與模型組相比，低劑量、高劑量治療組的存活率明顯升高（P＜0.05）。
　　2、血流動力學測定、肺小動脈形態(tài)學觀察及右心室肥厚指數(shù)測定：與對照組相比，模型組 mRVP、mPAP、RV/(LV+S)顯著升高（P＜0.01），肺小動脈管壁明顯增厚，管腔狹窄，炎癥程度、WA％、WT％明顯高于對照組(P＜0.01)。與模型組相比，治療組中mRVP、mPAP、RV/(LV

5、+S)、炎癥程度、WA％、WT％均顯著下降（P＜0.05），肺動脈管壁增厚程度及管腔狹窄程度均顯著減輕（P＜0.05），以高劑量治療組下降更明顯。低劑量與高劑量治療組相比，mRVP、mPAP無差異性（P＞0.05），RV/(LV+S)、WA％、WT％差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但均未恢復至對照組水平（P＜0.01）。
　　3、肺小動脈ALK-1、Smad1蛋白表達：模型組ALK-1、Smad1蛋白較對照組明顯表達（P＜0.0

6、1）；低劑量、高劑量治療組表達較模型組有不同程度下降（P＜0.05），劑量間有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但均未恢復至對照組水平（P＜0.05）。
　　4、平滑肌細胞增殖及凋亡情況：模型組 PCNA平均吸光度顯著高于對照組（P＜0.01），低劑量、高劑量治療組較模型組均有不同程度降低（P＜0.05），且劑量間有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但均未下降至對照組水平（P＜0.01）；模型組TUNEL平均吸光度顯著低于對照組（P＜0.01

7、），高劑量治療組較模型組明顯升高（P＜0.05），低劑量、高劑量治療組間有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但均未升高至對照組水平（P＜0.01）。
　　5、肺組織ALK-1、Smad1蛋白表達量：模型組ALK-1蛋白、Smad1蛋白表達量較對照組顯著升高（P＜0.01）；低劑量、高劑量治療組表達量較模型組有不同程度降低（P＜0.05），劑量間有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），但均未恢復到對照組水平（P＜0.01）。
　　結論：ALK