毛細(xì)管電泳在中藥有效成分研究中的應(yīng)用.pdf

1、毛細(xì)管電泳(CE)因具有分離效率高、分析速度快、自動化程度高、使用范圍廣、樣品用量少、分離模式多以及毛細(xì)管不易被污染等優(yōu)點，目前已發(fā)展成為藥學(xué)研究領(lǐng)域一種重要的分離分析技術(shù)。本論文利用毛細(xì)管電泳技術(shù)建立了同時快速測定中藥中多種有效成分含量的分析方法，并對藥物活性成分與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用進行了研究。
　　 本文綜述了毛細(xì)管電泳技術(shù)的發(fā)展、優(yōu)勢及其在中藥有效成分研究中的應(yīng)用情況，主要做了以下幾個方面的工作：
　　

2、 1．建立了毛細(xì)管區(qū)帶電泳法同時測定炎可寧片中小檗堿、巴馬汀、藥根堿、大黃素、大黃酸5種藥效成分的方法。采用未涂層彈性石英毛細(xì)管(75μm×60cm)為分離通道，以90mmol·L-1三羥甲基氨基甲烷(Tris)-10mmol·L-1檸檬酸(含30％乙腈，pH=8.0)為電泳緩沖溶液，5種被測組分在10min內(nèi)達(dá)到基線分離。各組分的檢出限分別為0.10、0.30、0.30、0.20、0.20μg·mL-1，樣品加標(biāo)回收率在95.0％～

3、107％之間。
　　 2．建立了毛細(xì)管膠束電動色譜法同時測定連花清瘟膠囊中的甘草苷、蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、綠原酸、大黃酸6種藥效成分含量的分析方法。以50mmol·L-1十二烷基硫酸鈉(SDS)-15mmol·L-1磷酸氫二鈉-15mmol·L-1硼酸(含25％異丙醇，pH=8.0)作電泳緩沖溶液，于254nm下紫外檢測，實驗考察了SDS濃度、電泳緩沖液的pH和濃度，以及有機改性劑等影響因素，通過條件的優(yōu)化，實現(xiàn)了6種組分的有

4、效分離。各組分的檢出限分別為1.5、1.0、0.50、0.50、1.5、0.30μg·mL-1，樣品加標(biāo)回收率在90.0％～108％之間。
　　 3．建立中藥復(fù)方制劑感冒軟膠囊中鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、葛根素及黃芩苷4種活性成分同時測定的毛細(xì)管膠束電動色譜法。電泳緩沖溶液為：10mmol·L-1磷酸氫二鈉-20mmol·L-1硼酸，內(nèi)含20mmol·L-1SDS及體積分?jǐn)?shù)分別為27％異丙醇和18％乙腈作有機改性劑，4種活性成分

5、都獲得基線分離。各組分的檢出限分別為0.50、0.80、0.60、1.5μg·mL-1，樣品加標(biāo)回收率在91.0％～109％之間。
　　 4．采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法研究了鹽酸麻黃堿、磷酸可待因與BSA的結(jié)合常數(shù)。在pH7.4、濃度25mmol·L-1Tris-HC1的電泳緩沖溶液及分離電壓20kV，紫外檢測波長214nm，溫度37℃的條件下，測得鹽酸麻黃堿、磷酸可待因與BSA的結(jié)合常數(shù)分別為1.46×104，0.75×104L·m