固定高濃度CO2富油微藻的篩選及脂質(zhì)累積的過程生化研究.pdf

1、為了降低微藻生物質(zhì)柴油制備的成本及獲得具有工業(yè)化應(yīng)用潛力的微藻藻株，本研究旨在通過限制性篩選，獲得能夠固定高濃度CO2的具有生物柴油生產(chǎn)潛力的微藻藻株;利用此藻株為研究對象，建立微藻油脂原位監(jiān)控技術(shù);探究氮源濃度對微藻細(xì)胞生長和胞內(nèi)油脂含量的影響，為工業(yè)煙道廢氣的固定減排及微藻生物質(zhì)能的深入研究奠定基礎(chǔ)。
　　本研究主要包括以下內(nèi)容:
　　(1)從甘肅天水發(fā)電廠附近采集的微酸性水樣進(jìn)行平板分離并在培養(yǎng)基中通入含有20％ CO

2、2進(jìn)行篩選，得到了兩株具備煙道氣CO2固定耦連微藻油脂生產(chǎn)潛能的藻株，經(jīng)形態(tài)及分子生物學(xué)鑒定均為小球藻，命名為Chlorella pyrenoidosaJ01和Chlorella sorokiniana XJ02（J01 Genbank18S rRNA和ITS-2的登錄號(hào)為KC416209和KC416206，J02的分別為KC416208和KC416207）。在通20％ CO2復(fù)篩條件下，藻株XJ01和XJ02的生物量為1.81 g/L

3、和1.52 g/L，油脂含量為31.5％和40.13％，二氧化碳固定效率為0.28 g/L/d和0.24g/L/d。對兩株株藻細(xì)胞中油脂脂肪酸組成進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，藻株J01和J02細(xì)胞中油脂都主要由C16和C18的飽和和不飽和脂肪酸組成，適于優(yōu)質(zhì)生物柴油的生產(chǎn)。
　　(2)以蘇丹黑B為染料，藻株XJ01和J02為研究對象，建立并優(yōu)化了蘇丹黑B染色檢測微藻細(xì)胞中油脂累積的方法，利用此方法檢測兩株藻細(xì)胞內(nèi)油脂含量。結(jié)果表明，兩株藻細(xì)胞內(nèi)

4、油脂含量在生長對數(shù)期中期開始快速增加，到生長穩(wěn)定期時(shí)達(dá)到最高，隨后開始緩慢降低，且通高濃度CO2(20％)有助于微藻細(xì)胞內(nèi)油脂累積，此結(jié)果與利用蘇丹黑B將微藻細(xì)胞染色后在顯微鏡下觀察到的胞內(nèi)油滴累積結(jié)果基本相符。
　　(3)探究了氮源濃度對藻株XJ01和J02細(xì)胞生長、細(xì)胞內(nèi)油脂含量的影響情況。結(jié)果表明，在微藻培養(yǎng)前期，相對較低的氮源濃度對藻細(xì)胞的生長更有利，而就整體生長而言，相對較低的氮源濃度影響微藻生物量的獲得，但利于微藻胞內(nèi)