基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的溫絡(luò)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、中藥復(fù)方是中醫(yī)辨證論治、整體觀思維的具體表現(xiàn),它是一組具有化學(xué)成分非常復(fù)雜、干擾因素眾多等特點(diǎn)的典型復(fù)雜體系。中藥復(fù)方通過君臣佐使各味藥材之間的配伍組合,針對(duì)疾病的病因病機(jī),通過適當(dāng)?shù)慕o藥途徑被吸收入血,整體協(xié)同互濟(jì)達(dá)到治療疾病的目的。溫絡(luò)方是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎濕寒阻絡(luò)證的代表方劑。
　　 溫絡(luò)方由白術(shù)、卷柏、附子、桂枝組成,為治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的驗(yàn)方。為揭示溫絡(luò)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),提高整方的質(zhì)量控制手段,本論文采用HPLC-DAD-M

2、Sn的技術(shù)手段研究了溫絡(luò)方主要的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),具體研究?jī)?nèi)容如下所示:
　　 第一部分文獻(xiàn)綜述
　　 總結(jié)了溫絡(luò)方的臨床應(yīng)用和現(xiàn)代研究,并對(duì)溫絡(luò)方復(fù)方的四個(gè)單味藥白術(shù)、卷柏、附子以及桂枝的化學(xué)成分進(jìn)行了綜述。共引用參考文獻(xiàn)66篇。
　　 第二部分溫絡(luò)方中卷柏化學(xué)成分的定性研究
　　 首先建立了溫絡(luò)方中卷柏藥材的液質(zhì)聯(lián)用定性分析方法。應(yīng)用HPLC-DAD-MSn技術(shù)對(duì)卷柏中主要的雙黃酮類化合物進(jìn)行了鑒定。通過

3、對(duì)含有三種雙黃酮母核(穗花杉雙黃酮、羅伯斯塔雙黃酮、扁柏雙黃酮)的7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜裂解途徑及紫外吸收光譜進(jìn)行的研究,總結(jié)出了卷柏中主要三類雙黃酮的質(zhì)譜裂解規(guī)律與紫外吸收特征。并據(jù)此鑒定出卷柏藥材中17個(gè)雙黃酮化合物,其中5個(gè)化合物為卷柏中未見報(bào)道的成分。卷柏主要成分的鑒定為溫絡(luò)方全方定性以及其他富含雙黃酮藥材成分的快速鑒定奠定了基礎(chǔ)。
　　 第三部分溫絡(luò)方中自術(shù)化學(xué)成分的定性研究
　　 建立了溫絡(luò)方中自術(shù)藥材的液質(zhì)聯(lián)用定性

4、分析方法。首先使用高分辨質(zhì)譜對(duì)白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的質(zhì)譜裂解規(guī)律進(jìn)行了深入的研究。后采用HPLC—DAD-MSn技術(shù)對(duì)白術(shù)藥材中主要的化合物進(jìn)行了鑒定。共檢測(cè)出40個(gè)化合物,鑒定出其中的18個(gè)成分,其中3個(gè)未在白術(shù)的化學(xué)成分報(bào)道過,并推測(cè)出另外16個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)類型。鑒定出的化合物包括9個(gè)倍半萜內(nèi)酯類成分以及9個(gè)聚烯炔類成分。白術(shù)HPLC-DAD-MSn分析條件的建立及主要化合物的分析鑒定,為溫絡(luò)方全方定性以及蒼術(shù)屬藥材成

5、分的快速鑒定奠定了基礎(chǔ)。
　　 第四部分溫絡(luò)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究
　　 1、溫絡(luò)方化學(xué)成分的定性研究
　　 在對(duì)白術(shù)及卷柏化學(xué)成分定性研究的基礎(chǔ)上,采用HPLC-DAD-MSn技術(shù)對(duì)溫絡(luò)方的主要化學(xué)成分進(jìn)行了分析,檢測(cè)出48個(gè)化合物,鑒定推測(cè)出其中的44個(gè)化合物,包括12個(gè)來源于白術(shù)的倍半萜與聚乙炔成分；11個(gè)來源于卷柏的雙黃酮與炔酚成分；15個(gè)來源于附子的生物堿類成分；6個(gè)來源于桂枝的苯丙素類小分子化合物。復(fù)方

6、的定性研究工作為下一步復(fù)方入血研究及主要成分定量研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 2、溫絡(luò)方活性部位入血移行成分初步研究
　　 采用HPLC-DAD-MSn技術(shù)對(duì)溫絡(luò)方的入血移行成分進(jìn)行了初步研究。通過比較含藥血漿、空白血漿、溫絡(luò)方活性部位的質(zhì)譜信息,發(fā)現(xiàn)了10個(gè)以原型入血的化合物,包括來自白術(shù)的倍半萜內(nèi)酯成分、來自卷柏的雙黃酮成分、來自于附子的二萜類生物堿成分以及來自于桂枝的苯丙素類小分子化合物,尤其以來自白術(shù)及桂枝的小分子成分