納豆菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、本研究首先以不同納豆菌抗菌粗提液，對不同的指示菌做抑菌實(shí)驗，選出最佳的指示菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌；利用不同納豆菌抗菌粗提液對這兩種菌做抑菌實(shí)驗篩選出納豆菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)較多的菌種；對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌進(jìn)行納豆菌液體發(fā)酵產(chǎn)抗菌物質(zhì)的培養(yǎng)條件的優(yōu)化；并對納豆菌抗菌粗提液的部分理化性質(zhì)、與抗生素及防腐劑的對照實(shí)驗、最小抑菌稀釋倍數(shù)進(jìn)行研究；對抗菌物質(zhì)初步分離純化，確定抗菌物質(zhì)分子量范圍。 研究結(jié)果表明，抗菌粗提液對酵母菌和霉菌均

2、無抑菌效果，對致病菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑菌效果較好。通過單因素試驗對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑菌圈直徑的測量為指標(biāo)確定了納豆菌液體發(fā)酵產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的最佳條件。抑制金黃色葡萄球菌的納豆菌發(fā)酵條件：碳源為甘油2﹪，氮源為0.5﹪大豆分離蛋白，裝液量20ml/100ml，接種量0.5﹪，初始pH7.0，培養(yǎng)時間72h，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，培養(yǎng)溫度25℃；抑制大腸桿菌的納豆菌發(fā)酵條件：碳源為甘油3﹪，氮源為0.5﹪大豆分離蛋白，裝液

3、量20ml/100ml，接種量0.5﹪，初始pH7.0，培養(yǎng)時間60h，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，培養(yǎng)溫度30℃。納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)具有良好的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性。即在4℃下24h，60℃、80℃、100℃、121℃下20min，在pH值從4到12的范圍內(nèi)，抑菌效果也基本不變。金屬離子對抑菌效果有促進(jìn)作用的有Ca2+、Al3+、Mg2+和Fe2+，而Cu2+、Mn2+、Zn2+則抑制抗菌物質(zhì)的產(chǎn)生。經(jīng)實(shí)驗證實(shí)納豆菌種具有良好的遺傳穩(wěn)定

4、性。納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)的抑菌效果優(yōu)于抗生素(慶大霉素)及防腐劑的抑菌效果。納豆菌抗菌粗提液在很小濃度下就有抑菌效果。當(dāng)指示菌為金黃色葡萄球菌時，納豆菌抗菌粗提液最小抑菌稀釋倍數(shù)為27；當(dāng)指示菌為大腸桿菌時，納豆菌抗菌粗提液最小抑菌稀釋倍數(shù)為26。 納豆菌抗菌粗提液經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過濾后采用SephadexG-25葡聚糖凝膠柱對納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)進(jìn)行分離，分離出的樣液做抑菌實(shí)驗，并通過做標(biāo)準(zhǔn)曲線求得抗菌物質(zhì)分子量范圍為