環(huán)氧化酶-2、CD44V6和MMP-9在大腸癌的表達及意義.pdf

1、目的：檢測環(huán)氧化酶-2（COX-2）、CD44V6和MMP-9在大腸癌組織中表達情況，以便進一步探討其表達與腫瘤細胞侵襲性的關(guān)系及在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為大腸癌的治療提供新的思路。
　　 方法：收集河北大學附屬醫(yī)院病理科2006年3月-2007年10月手術(shù)治療的68例大腸癌病人（其中男性35例、女性33例）的病理標本，年齡41-72歲，平均年齡54.12歲。其中結(jié)腸癌31例，直腸癌37例。另取癌周遠端腸壁組織15例作為對照。

2、按WHO（2000）消化道腫瘤的病理及分級標準進行組織學分級及大腸癌Duke's分期。本研究68例大腸癌中，高分化腺癌（Ⅰ級）18例（26.5％），中分化腺癌（Ⅱ級）31例（45.6％），低分化及粘液腺癌（Ⅲ級）19例（27.9％）。Duke's分期A期18例、B期22例、C期19例、D期9例。有腸系膜淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例（27.9％），有遠處轉(zhuǎn)移9例（13.2％）。全部標本遠端均未見癌浸潤。HE染色，鏡檢明確診斷，均為腺癌。采用免疫組化技

3、術(shù)檢測15例對照組腸組織、68例大腸癌組織中COX-2及CD44V6、 MMP-9的表達情況。
　　 免疫組化結(jié)果判定，所有的切片均在光學顯微鏡下盲法評分。隨機選擇5個高倍鏡視野（x400）進行判斷， COX-2、MMP-9陽性細胞以胞漿著色為主，陽性信號為細胞漿呈棕黃色著色。而CD44V6陽性細胞以胞膜及少量胞漿呈棕黃色著色為主。以腫瘤細胞陽性百分數(shù)及染色強度進行腫瘤細胞陽性計分，2個分值相加即為該標本的免疫組化陽性計分。染色

4、強度評分：0分為無色；1分為細胞染色呈淺黃色（輕度）；2分為細胞染色呈黃色（中度）；3分為細胞染色呈棕褐色（重度）。陽性細胞比例評分：無陽性細胞表達為0；陽性細胞比例1％-25％為1分；陽性細胞比例26％-50％為2分；陽性細胞比例51％-75％為3分；陽性細胞比例76％－100％為4分。每例細胞染色積分按上述二者評分之和分為：陰性表達或無表達（－），0－1分；弱陽性（+），2－3分；陽性（++），4－5分；強陽性（+++），6－7分。

5、積分>=2分，為陽性。
　　 統(tǒng)計分析使用SPSS12.0軟件包。對免疫組化結(jié)果采用卡方檢驗和單因素方差分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.COX-2在大腸癌及癌旁遠端正常腸壁組織中的表達
　　 COX-2主要表達于大腸癌細胞的胞漿，68例大腸癌組織中COX-2的表達陽性率為61.8％（42/68），38.2％為陰性（26/68）。15例遠端腸壁組織中COX-2蛋白表達均為陰性。實驗結(jié)果顯示大腸癌組織和遠端正

6、常腸壁組織COX-2的表達有顯著性差異（P<0.05），COX-2在大腸癌組織高表達。
　　 2.CD44V6在大腸癌及癌旁遠端正常腸壁組織中的表達
　　 CD44V6陽性表達的大腸癌細胞胞膜呈棕黃色均勻著色，陽性腫瘤細胞散在分布。68例大腸癌組織中CD44V6表達的總陽性率為73.5％（50/68），CD44V6在15例遠端正常腸壁組織表達為陰性，二者比較有顯著性差異（P<0.05）；CD44V6在大腸癌組織中高表達。

7、
　　 3.MMP-9在大腸癌及癌旁遠端正常腸壁組織中的表達
　　 MMP-9陽性染色主要表達于腫瘤細胞胞漿，呈棕黃色彌漫分布，著色較強的位于腫瘤細胞浸潤區(qū)域。MMP-9在大腸癌組織中陽性率為72.1％（49/68），在15例遠端正常腸壁組織中未見明顯染色；兩者比較有顯著性差異（P<0.05），MMP-9在大腸癌組織中表達明顯高于遠端正常腸壁組織。
　　 4.COX-2與CD44V6和MMP-9在大腸癌中表達的關(guān)

8、系
　　 COX-2表達陽性組，CD44V6陽性表達率為68.57％明顯高于COX-2表達陰性組的38.09％（P<0.05）。經(jīng)檢驗，COX-2與CD44V6蛋白在大腸癌的表達呈正相關(guān)性（P=0.000）。COX-2表達陽性組，MMP-9陽性表達率為88.57％，明顯高于COX-2表達陰性組的38.09％（P<0.05）。經(jīng)檢驗COX-2與MMP-9蛋白表達有正相關(guān)性（P=0.000）。
　　 5.COX-2、CD44

9、V6和MMP-9的高表達與大腸癌臨床病理學特征之間的關(guān)系
　　 實驗顯示COX-2、CD44V6和MMP-9在癌組織中高表達與大腸癌患者性別、年齡及部位沒有關(guān)系（P>0.05）。但隨著Dukes'分期增高、漿膜浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，COX-2、CD44V6和MMP-9表達陽性率顯著增高。COX-2的高表達和大腸癌的病理分化有關(guān)。高、中分化組表達率與低分化組（Ⅲ）COX-2陽性表達率84.2％比較，均有顯著差異（X2=8.045，P=

10、0.018），低分化組明顯高于高、中分化組；不同病理分化程度的大腸癌中CD44V6的陽性表達率隨分化程度的降低而增高，但三者（高、中、低分化）間的陽性表達率均無顯著性差異（P>0.05），CD44V6表達與大腸癌的病理分化程度無關(guān)。MMP-9在大腸癌中的表達隨著病理分化程度的降低而增強，低分化組陽性表達率100％明顯高于高分化組44.4％、中分化組70.9％；且三者比較均有顯著性差異，（X2=14.203，P=0.001）。
　　

11、 結(jié)論：
　　 1、正常大腸組織COX-2及CD44V6和MMP-9均呈陰性表達。
　　 2、COX-2蛋白在大腸癌過度表達，并與病理分級密切相關(guān)，低分化大腸癌COX-2表達明顯高于高、中分化的腫瘤。
　　 3、大腸癌CD44V6和MMP-9的表達均明顯增加，且隨腫瘤級別的增高而增高。這兩種蛋白在大腸癌的表達與COX-2的表達呈正相關(guān)性。
　　 4、COX-2及CD44V6和MMP-9在大腸癌形成、演化