中國荷斯坦奶牛DGAT2、Leptin基因多態(tài)性與產(chǎn)奶性狀關(guān)系研究.pdf

1、本試驗以200頭中國荷斯坦奶牛為研究對象，采用PCR-SSCP技術(shù)對DGAT2基因和Leptin基因的多態(tài)性進行了分析，并結(jié)合測序?qū)ζ浠虻?’端、外顯子和內(nèi)含子進行了序列分析，旨在探索DGAT2，Leptin基因?qū)δ膛．a(chǎn)奶性狀的影響，為今后良種奶牛的選育提供一定的理論依據(jù)。研究結(jié)果如下： 1.DGAT2基因第4外顯子多態(tài)性及序列分析 采用PCR-SSCP分子標記方法對中國荷斯坦奶牛DGAT2基因第4外顯子進行了多態(tài)性分

2、析，檢測到AA型和AB型兩種基因型，其頻率分別為0.8450，0.1550。測序結(jié)果顯示，AA型在481 bp處的G變?yōu)锳。 2.DGAT2基因第5內(nèi)含子多態(tài)性及序列分析 在DGAT2基因第5內(nèi)含子處，引物DGAT2P4擴增片段檢測到AA、BB、AB和AC四種基因型，其頻率分別為0.0600，0.5200，0.3250，0.0950。測序結(jié)果顯示，AA型在132 bp處的C變?yōu)門,在177 bp處的A變?yōu)镚;AC型在18

3、5bp處的A變?yōu)門。 3.DGAT2基因第6內(nèi)含子多態(tài)性及序列分析 在中國荷斯坦奶牛DGAT2基因第6內(nèi)含子處，引物DGAT2P5擴增片段檢測到KK，MM和KM三種基因型，其頻率分別為0.5600，0.2150，0.2250。測序結(jié)果顯示，MM型在1740 bp處的C變?yōu)門,1766 bp處的A堿基發(fā)生缺失，1927 bp處的G變?yōu)锳，2012 bp處的T變?yōu)镚 2065 bp處的T變?yōu)镃。 4.Leptin基因

4、5’UTR多態(tài)性及序列分析 在中國荷斯坦奶牛Leptin基因5’側(cè)翼區(qū)，引物LeptinP1擴增片段檢測到AA、BB和AB三種基因型，其頻率分別為0.5000，0.1950，0.3050。測序結(jié)果顯示，BB型在1547bp處的C變?yōu)镚。 5.Leptin基因第2外顯子多態(tài)性及序列分析 在Leptin基因第2外顯子處，引物LeptinP2擴增片段檢測到AA、BB和AB三種基因型，其頻率分別為0.5350，0.140

5、0，0.3250。測序結(jié)果顯示，BB型在204 bp處的C變?yōu)門。 6.Leptin基因第2內(nèi)含子多態(tài)性及序列分析 在Leptin基因第2內(nèi)含子處，引物LeptinP3擴增片段檢測到AA，BB和AB三種基因型，其頻率分別為0.6250，0.0800，0.2950。測序結(jié)果顯示，AA型在106 bp處的C堿基和109 bp處的T堿基均變?yōu)锳堿基。 7.Leptin基因第3外顯子多態(tài)性及序列分析 在Lepti

6、n基因第3外顯子處，引物LeptinP4擴增片段檢測到AA和AB兩種基因型，其頻率分別為0.8100，0.1900。測序結(jié)果顯示，比對后發(fā)現(xiàn)AA型在96 bp處的C變?yōu)門；AB型在268 bp處的T變?yōu)镃，在253 bp和352 bp處的C均變?yōu)門。 8.DGAT2基因和Leptin基因的多態(tài)性與產(chǎn)奶性狀之間的關(guān)系 本試驗將DGAT2基因和Leptin基因作為影響中國荷斯坦奶牛產(chǎn)奶性狀的候選基因進行研究，研究發(fā)現(xiàn)在DGA

7、T2P2擴增片段中，AB基因型個體產(chǎn)奶量極顯著高于AA基因型個體(P<0.01)，與乳脂率和乳蛋白率相關(guān)性不顯著(P>0.05)；在DGAT2P4擴增片段中，AC基因型個體產(chǎn)奶量和乳脂率顯著或極顯著高于BB基因型和AB基因型個體(P<0.01或P<0.05)，基因型對乳蛋白率影響不大，未達到顯著水平(P>0.05)；在DGAT2P5擴增片段中，MM基因型個體產(chǎn)奶量顯著高于KK基因型和KM基因型個體(P<0.01)，與乳脂率和乳蛋白率相關(guān)

8、性不顯著(P>0.05)；在LeptinP1擴增片段中，BB基因型個體產(chǎn)奶量和乳脂率顯著或極顯著高于AA基因型和AB基因型個體(P<0.01或P<0.05)，與乳蛋白率相關(guān)性不顯著(P>0.05)；在LeptinP2擴增片段中，BB基因型個體產(chǎn)奶量、乳脂率和乳蛋白率均顯著或極顯著高于AA型個體(P<0.01或．P<0.05)；在LeptinP3擴增片段中，BB基因型個體產(chǎn)奶量和乳蛋白率均顯著或極顯著高于AA型個體(P<0.01或P<0.