灌腸方治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎是一種以直腸、結(jié)腸粘膜非特異性炎癥、潰瘍形成為主要特征的病變。臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、里急后重、粘液膿血便、腹痛等。病程遷延，常反復(fù)發(fā)作。其病因和發(fā)病機(jī)制目前認(rèn)為主要與免疫、遺傳、環(huán)境等因素的相互作用有關(guān)。近年來，潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病率在我國有增高趨勢，臨床上多采用美沙拉嗪及柳氮磺胺吡啶治療。
　　 潰瘍性結(jié)腸炎歸屬于中醫(yī)學(xué)“痢疾”、“泄瀉”、“便血”“滯下”、“腸風(fēng)”等范疇。其病因病機(jī)包括感受外邪、勞倦內(nèi)傷或飲食不潔、情

2、志失調(diào)、脾腎陽虛等方面。中醫(yī)治療潰瘍性結(jié)腸炎的方法主要有中藥方劑內(nèi)服、灌腸、中藥加灌腸、中藥栓劑及其它劑型局部給藥、單味中藥、中西藥結(jié)合、針灸等。其療效顯著，無明顯副作用，并且價(jià)廉，顯示出中醫(yī)藥治療本病的優(yōu)越性和廣闊的前景。中藥灌腸是臨床常用的治療方法之一，灌腸可以使藥物直達(dá)病所，藥物利用率高，且副作用少，所以臨床應(yīng)用較多。
　　 本課題歷經(jīng)文獻(xiàn)研究、臨床研究、實(shí)驗(yàn)研究三個(gè)階段，從臨床及實(shí)驗(yàn)研究兩方面來研究灌腸方治療潰瘍性結(jié)腸炎

3、的臨床療效及其作用機(jī)制，為中醫(yī)藥治療潰瘍性結(jié)腸炎提供思路。論文分為三個(gè)部分：
　　 第一部分：文獻(xiàn)綜述
　　 1.古代中醫(yī)對潰瘍性結(jié)腸炎病因、病機(jī)的總結(jié)，并對其辨證論治做了系統(tǒng)總結(jié)?，F(xiàn)代中醫(yī)對潰瘍性結(jié)腸炎病因病機(jī)的認(rèn)識，對其各種治療方法做了系統(tǒng)論述，為本課題的臨床研究提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　 2.系統(tǒng)論述了近年來現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)理的研究進(jìn)展，包括免疫因素、細(xì)胞凋亡、遺傳、精神因素及環(huán)境因素的研究進(jìn)展

4、，為本課題的實(shí)驗(yàn)研究提供理論依據(jù)。
　　 第二部分：灌腸方治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床研究
　　 目的：1.通過采用隨機(jī)對照的臨床試驗(yàn)研究，觀察灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎濕熱內(nèi)蘊(yùn)證患者的臨床療效和安全性，為中醫(yī)藥治療潰瘍性結(jié)腸炎提供臨床依據(jù)。2.觀察灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎患者血清D—二聚體、血小板計(jì)數(shù)和血小板平均體積的影響，探討灌腸方發(fā)揮作用的途徑，分析濕熱內(nèi)蘊(yùn)證和血瘀證之間的聯(lián)系。
　　 方法：采用隨機(jī)對照的臨床試驗(yàn)方法，入

5、組40例，治療組20例，對照組20例。
　　 治療組給予灌腸方水煎液100ml保留灌腸，每晚1次，每日一劑。對照組給予柳氮磺胺吡啶口服，500mg/次，4次/d。治療3周后，觀察臨床療效、不良反應(yīng)以及治療前后血清D—二聚體、血小板計(jì)數(shù)和血小板平均體積水平的變化。
　　 結(jié)果：治療組總有效率為90.00％，對照組總有效率為75.00％，治療組療效明顯高于對照組(P<0.05)。治療組患者血清D—二聚體和血小板計(jì)數(shù)水平降低、

6、血小板平均倒積水平升高較對照組顯著(P<0.05)。治療組共發(fā)生可能與藥物相關(guān)的不良反應(yīng)1例(5％)，對照組發(fā)生可能與藥物相關(guān)不良反應(yīng)2例(10％)，兩組不良反應(yīng)發(fā)生率無顯著差別(P>0.05)。
　　 結(jié)論：灌腸方治療潰瘍性結(jié)腸炎療效顯著，可能是通過清熱利濕以改善瘀血狀態(tài)；降低血清D—二聚體和血小板計(jì)數(shù)水平以及升高血小板平均體積水平可能是其治療潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制之一。
　　 第三部分：灌腸方治療潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)研究<

7、br>　　 實(shí)驗(yàn)一：灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠一般情況及結(jié)腸粘膜形態(tài)的影響。
　　 目的：觀察灌腸方對三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎大鼠一般情況及結(jié)腸粘膜大體、病理變化的影響。
　　 方法：取3月齡SD大鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組(正常組，空白對照組，中藥低、中、高劑量組和西藥美沙拉嗪對照組)，每組10只。采用三硝基苯磺酸誘導(dǎo)法制作潰瘍性結(jié)腸炎模型，造模后第3d開始給予灌胃給藥，中藥治療組分別給予低、中、高劑量灌腸

8、方水煎液，西藥對照組給予美沙拉嗪，正常組及空白對照組給予等體積蒸餾水，每天1次，連續(xù)18天。觀察大鼠一般情況、體重及治療后結(jié)腸粘膜病理變化。
　　 結(jié)果：造模后的大鼠出現(xiàn)粘液膿血便或稀便，自主活動(dòng)減少，喜扎堆，食欲減退、倦怠懶動(dòng)、反應(yīng)遲緩。治療18天后，上述情況改善，中藥中、高劑量治療組及西藥對照組優(yōu)于中藥低劑量治療組，各組大鼠的體重?zé)o明顯差異。病理結(jié)果顯示中藥治療組及西藥對照組無粘膜層的壞死，僅有不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤，優(yōu)于空

9、白對照組，中藥中、高劑量組及西藥對照組優(yōu)于中藥低劑量組。說明藥物劑量與效果之間有一定相關(guān)性。
　　 實(shí)驗(yàn)二：灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠炎癥細(xì)胞因子的影響。
　　 目的：觀察灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠白介素—4和白介素—10的影響，探討灌腸方在抗炎方面的作用。
　　 方法：動(dòng)物分組、造模及藥物治療同實(shí)驗(yàn)一，ELISA法檢測各組大鼠血清白介素—4和白介素—10的水平。
　　 結(jié)果：中藥中、高劑量組和西藥美沙拉嗪對

10、照組之間無顯著性差異，其余各組之問均有顯著性差異(P<0.05)?？瞻讓φ战M大鼠血清白介素—4和白介素—10的含量明顯低于正常組，各中藥治療組及西藥對照組均高于空白對照組。提示灌腸方可能是通過升高白介素—4和白介素—10的水平，糾正了促炎癥性細(xì)胞因子和抗炎癥性細(xì)胞因子之間的失衡，發(fā)揮治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用。
　　 實(shí)驗(yàn)三：灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體的影響
　　 目的：研究灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠過

11、氧化物酶體增殖物激活受體mRNA水平的影響。
　　 方法：動(dòng)物分組、造模及藥物治療同實(shí)驗(yàn)一，RT—PCR法檢測各組大鼠結(jié)腸粘膜中過氧化物酶體增殖物激活受體mRNA的水平。
　　 結(jié)果：空白對照組大鼠結(jié)腸粘膜中過氧化物酶體增殖物激活受體基因表達(dá)明顯降低，與正常組比較有顯著性差異(P<0.05)。中藥中、高劑量組及西藥對照組大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體基因表達(dá)明顯升高，與空白對照組比較，有顯著性差異(P<0.05)，而中藥

12、低劑量組與空白對照組比較，無顯著性差異(P>0.05)。提示灌腸方可能是通過對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠低表達(dá)的過氧化物酶體增殖物激活受體的上調(diào)，抑制NF—κB的活化，進(jìn)而抑制促炎因子等炎癥相關(guān)因子表達(dá)，從而抑制炎癥的發(fā)生及發(fā)展，類似于過氧化物酶體增殖物激活受體激動(dòng)劑的作用，這可能是灌腸方發(fā)揮作用的機(jī)理之一。
　　 實(shí)驗(yàn)四：灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠核因子—κB p65的影響
　　 目的：研究灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠核因子—κB p

13、65mRNh水平的影響。
　　 方法：動(dòng)物分組、造模及藥物治療同實(shí)驗(yàn)一，RT—PCR法檢測各組大鼠結(jié)腸粘膜中核因子—κB p65 mRNA的水平。
　　 結(jié)果：空白對照組大鼠結(jié)腸組織中核因子—κB p65基因表達(dá)明顯升高，與正常組比較有顯著性差異(P<0.05)。中藥低、中、高劑量組及西藥對照組大鼠核因子—κB p65基因表達(dá)與空白對照組比較明顯降低，有顯著性差異(P<0.05)，而中藥低劑量組與中藥中、高劑量組比較明顯

14、增高，有顯著性差異(P<0.05)。提示灌腸方可能是通過對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠過高表達(dá)的核因子—κB p65的下調(diào)，抑制炎癥因子的活化，減輕上皮細(xì)胞的損傷，從而抑制炎癥的發(fā)生及發(fā)展。
　　 實(shí)驗(yàn)五：灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠Toll—like受體2的影響
　　 目的：研究灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠Toll—like受體2 mRNA水平的影響。
　　 方法：動(dòng)物分組、造模及藥物治療同實(shí)驗(yàn)一，RT—PCR法檢測各組大鼠結(jié)腸粘

15、膜中Toll—like受體2 mRNA的水平。
　　 結(jié)果：空白對照組大鼠結(jié)腸組織中Toll—1ike受體2基因表達(dá)明顯升高，與正常組比較有顯著性差異(P<0.05)。中藥低、中、高劑量組及西藥對照組大鼠Toll—like受體2基因表達(dá)與空白對照組比較明顯減低，有顯著性差異(P<0.05)，而中藥低劑量組明顯高于中藥中、高劑量組，有顯著性差異(P<0.05)。提示灌腸方對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠過高表達(dá)的Toll—like受體2有下調(diào)作

16、用，阻止核因子—κB的激活，阻止多種致病因子的跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少致炎因子的釋放，抑制過度的免疫反應(yīng)，發(fā)揮治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用。
　　 結(jié)論：灌腸方發(fā)揮作用的機(jī)制可能是：1、通過升高白介素—4和白介素—10的水平，抑制促炎因子的合成，增加抗炎因子的大量合成，糾正了促炎癥性細(xì)胞因子和抗炎癥性細(xì)胞因子之間的失衡；抑制淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的宿主自發(fā)免疫反應(yīng)，阻止炎癥的發(fā)生。2、上調(diào)過氧化物酶體增殖物激活受體的水平，抑制核因子—κB的活化和To