RGMa在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎中的表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：多發(fā)性硬化是一種致殘率較高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘性疾病。在病理上主要表現(xiàn)為位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)的多發(fā)性炎性脫髓鞘和軸突損傷，而后者又被認(rèn)為是多發(fā)性硬化致殘的主要原因。中樞神經(jīng)再生是近年來神經(jīng)康復(fù)的難點(diǎn)和熱點(diǎn)，而軸突生長抑制因子被認(rèn)為是導(dǎo)致中樞神經(jīng)再生困難的主要原因。近年來通過在脊髓損傷和腦損傷模型中的研究發(fā)現(xiàn)RGM（repulsive guidance molecule）不僅是一種軸突導(dǎo)向分子，還是一種對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)軸突再生具有

2、抑制作用的膜蛋白。RGM參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后軸突生長抑制性信號(hào)的傳遞，在軸突再生過程中起關(guān)鍵作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性硬化早期存在軸索損傷，RGM在多發(fā)性硬化的軸索損傷及修復(fù)中是否扮演著重要的角色？迄今尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬通過建立急、慢性多發(fā)性硬化模型，檢測(cè)RGM在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）大鼠腦和脊髓中的表達(dá)規(guī)律，從而推測(cè)RGM在多發(fā)性硬化疾病的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中的可能作用和機(jī)制。 方法：運(yùn)用豚鼠脊髓勻漿和完全

3、弗氏佐劑混合制成油包水抗原乳劑，并注射百日咳桿菌建立EAE大鼠模型。通過HE染色來判斷模型成功與否。分別設(shè)立正常對(duì)照組、EAE急性組、EAE慢性完全緩解組和EAE慢性部分緩解組，通過神經(jīng)功能缺損評(píng)分判斷大鼠臨床癥狀。通過RT-PCR來檢測(cè)RGMa mRNA在各個(gè)組中的表達(dá)規(guī)律，并通過免疫組化來檢測(cè)膜蛋白R(shí)GMa在各個(gè)組腦和脊髓中的表達(dá)規(guī)律。 結(jié)果：在正常對(duì)照組和EAE各組，RGMa mRNA在急性組表達(dá)量最高，在慢性組表達(dá)量較急

4、性組降低，但仍高于正常對(duì)照組。RGMa蛋白在正常對(duì)照組主要表達(dá)在腦皮質(zhì)、脊髓灰質(zhì)、白質(zhì)纖維束、少突膠質(zhì)樣細(xì)胞、脈絡(luò)叢、海馬和一些內(nèi)皮細(xì)胞；在EAE急性組RGMa蛋白陽性表達(dá)明顯較對(duì)照組增高，RGMa陽性表達(dá)主要聚集在病灶和病灶周圍的區(qū)域，如血管周圍浸潤的炎性細(xì)胞和病灶周圍增生的星形膠質(zhì)細(xì)胞；在EAE慢性組，RGMa蛋白的表達(dá)量較急性組稍有降低，但仍高于正常組，主要表達(dá)在病灶周圍大量增生的星形膠質(zhì)細(xì)胞。 結(jié)論：RGMa mRNA和