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文檔簡介
1、目的：腎間質(zhì)纖維化是幾乎所有慢性腎臟病(chronic kidney disease,CKD)走向終末期腎衰竭的共有病理途徑。由于其所涉及的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)及信號通路非常復(fù)雜，因此，盡管腎臟病學(xué)者做了大量相關(guān)研究并取得了一定的成效，但目前臨床上仍然缺乏真正有效的治療措施，抗腎臟纖維化手段相對單一?；谏鲜鏊伎?，大力發(fā)掘中草藥潛力，加強(qiáng)療效顯著的臨床驗方的研究是十分必要的。本實驗旨在觀察經(jīng)驗方排毒保腎湯含藥血清對轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β
2、1)刺激的人腎小管上皮細(xì)胞(HKC)表達(dá)結(jié)締組織生長因子(CTGF)及α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的影響，以進(jìn)一步探討該方阻抑腎間質(zhì)纖維化，保護(hù)腎臟的可能作用機(jī)制。
方法：制備排毒保腎湯含藥血清及正常兔血清。將體外培養(yǎng)的HKC分為5組進(jìn)行處理(單純TGF-β1干預(yù)組、低劑量含藥血清組、中劑量含藥血清組、高劑量含藥血清組及正常對照組)采用RT-PCR及免疫組化法檢測不同劑量的兔含藥血清對TGF-β1(10ng/ml)誘導(dǎo)
3、下的HKC表達(dá)α-SMA mRNA及CTGF蛋白水平的影響。
結(jié)果：采用RT-PCR檢測α-SMA mRNA的表達(dá)，經(jīng)TGF-β1誘導(dǎo)48h后，單純干預(yù)組α-SMAmRNA表達(dá)較正常對照組顯著增加(p<0.01),而不同劑量含藥血清均可抑制α-SMAmRNA表達(dá)。隨著排毒保腎方含藥血清劑量升高，α-SMAmRNA表達(dá)量呈下降趨勢，其中高劑量與低劑量含藥血清組比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。采用免疫組化法檢測CTG
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