珙桐產(chǎn)黃酮內生真菌的分離及鑒定.pdf

1、珙桐(DavidiainvolucrateBaill.)為我國特有的第三紀古熱帶植物的孑遺樹種，被列為我國一級保護植物。研究表明，珙桐葉提取物中含有槲皮素、山奈酚等黃酮類物質。本研究從內生真菌的角度出發(fā)，對珙桐中的內生真菌進行研究，結果如下： 1、采用組織分離法從珙桐組織中分離了126株內生真菌。經(jīng)對比實驗，內生真菌分離時，植物組織的表面消毒以75％酒精和0.1％升汞結合的方法較好；對琪桐莖部的升汞消毒時間以4～5min為宜，珙

2、桐葉子的升汞消毒時間應控制在2min左右。珙桐中分離到的126株內生真菌主要分布在樹葉和莖中。 2、以金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、大腸桿菌(Escherichiacold為測試菌種，對初選的126株珙桐內生真菌進行代謝產(chǎn)物活性篩選。其產(chǎn)物對三種細菌的抑菌率分別為65％、71％、25％，其中D37菌株對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強。 3、對具

3、抑菌活性的菌株D37進行液體發(fā)酵。經(jīng)高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)分析證明菌株D37的次生代謝產(chǎn)物中含有槲皮素、山奈酚二種黃酮類物質，每100g干菌絲可產(chǎn)黃酮31.9mg/100g。 4、根據(jù)菌株D37的形態(tài)學特征，結合核糖體內部轉錄序列(internaltranscribedspacer，ITS)的測定結果，確定菌株D37為曲霉屬，煙曲霉種(Aspergillu