上海地區(qū)不同動物源隱孢子蟲種型鑒定及微小隱孢子蟲CP15和P23基因的克隆和表達.pdf

1、隱孢子蟲是一種嚴重危害人和動物健康的寄生原蟲，廣泛寄生于人、哺乳動物、鳥類、兩棲類和魚類的消化道和呼吸道中，引起腹瀉等癥狀。對免疫功能正常的動物，腹瀉可自限，但免疫功能缺陷時，常表現(xiàn)水瀉不止甚至死亡。 隱孢子蟲不同種性狀有別，寄生宿主的對象不一。本研究利用PCR-RFLP技術成功鑒定了本實驗室收集的上海地區(qū)分離的鼠源、兔源、雞源、豬源、牛源隱孢子蟲蟲種和基因型，共有3個蟲種和3個基因型，其中鼠源隱孢子蟲蟲種為微小隱孢子蟲鼠基因型

2、(CparvumMouse genotype)；兔源隱孢子蟲蟲種為微小隱孢子蟲兔基因型(C．parvum Rabbit genotype)；豬源隱孢子蟲蟲種為微小隱孢子蟲豬基因型Ⅱ(C．parvum Pig genotype Ⅱ)：雞源隱孢子蟲蟲種為貝氏隱孢子蟲(C．baileyi)：牛源隱孢子蟲蟲種為安氏隱孢子蟲(C．a(chǎn)ndersoni)。 成功克隆了上海地區(qū)分離的微小隱孢子蟲鼠基因型、兔基因型、豬基因型Ⅱ和安氏隱孢子蟲的子孢

3、子表面抗原CP15基因，其編碼基因為大小為357bp，編碼119個氨基酸殘基，不同來源的CP15基因序列高度一致。其中安氏隱孢子蟲的CP15基因成功克隆為本研究首次報道。 成功克隆了上海地區(qū)分離的微小隱孢子蟲鼠基因型、兔基因型和豬基因型Ⅱ的子孢子表面抗原P23基因，大小為342bp，編碼113個氨基酸，不同來源的P23基因序列高度一致。 成功構(gòu)建了微小隱孢子蟲鼠基因型的原核重組表達質(zhì)粒pET-28a(+)-CP15和pE