鴨甲肝病毒3型山東臨沂分離株的分離鑒定及P1基因的序列分析.pdf

1、鴨病毒性肝炎是雛鴨一種急性和高度致死性傳染病，主要感染1～3周齡雛鴨，死亡率高達90％以上。目前該病已成為影響世界水禽養(yǎng)殖業(yè)的重要疫病之一。DHAV可分為基因A型、B型和C型，相當于歷史上所稱的DHV-1、2007年發(fā)現(xiàn)于臺灣的DHV“臺灣新型”和2007發(fā)現(xiàn)于韓國的DHV“韓國新型”。由于這三個基因型病毒之間的交叉保護力很差，所以將這三個基因型分別對應于三個血清型，即DHAV-1型、DHAV-2型和DHAV-3型。本研究主要分為三部分

2、:
　　第一部分 48株DHAV-3的病毒分離和PT-PCR鑒定
　　采集2012～2013年山東省臨沂市110份病死鴨肝組織。病料研磨處理后，分別經(jīng)尿囊腔接種11日齡鴨胚，收獲45份死亡鴨胚尿囊液。收獲的每份尿囊液分別經(jīng)腿部肌肉注射接種2～3日齡的健康雛鴨5只，0.2mL/只。接種24小時后雛鴨開始出現(xiàn)死亡，病死鴨均呈現(xiàn)典型的鴨甲肝病毒性肝炎的臨床癥狀和病理變化。根據(jù)GeneBank已公布的DHAV-3的核酸序列設(shè)計引物對

3、分離病毒進行RT-PCR擴增，結(jié)果表明自山東省臨沂市分離到48株DHAV-3。
　　第二部分 鴨甲肝病毒3型山東臨沂分離株P(guān)1基因的序列分析
　　本研究對從山東臨沂分離到的48株DHAV-3分離株中的7株的P1基因進行序列測定分析。結(jié)果顯示，7株DHAV-3的P1基因的核酸序列和氨基酸序列具有高度同源性，分別為98.6％～99.8％和99.6％～100％。與GenBank中已經(jīng)發(fā)布的22株DHAV-3型的P1基因的核苷酸和氨