IgA腎病中足細(xì)胞損傷的機(jī)制及其意義.pdf

1、第一部分IgA腎病中足細(xì)胞的損傷及其表現(xiàn) 目的：了解IgA‘腎病中是否存在足細(xì)胞損傷，并且觀察損傷的主要表現(xiàn)。方法：收集37位伴有明顯蛋白尿(24小時(shí)尿蛋白定量>1．0g/24h)的IgA腎病患者，以腎錯(cuò)構(gòu)瘤術(shù)后切除腎和。腎癌術(shù)后遠(yuǎn)離癌旁腎組織8例為正常對(duì)照。取腎穿刺標(biāo)本，通過(guò)免疫組織化學(xué)方法觀察WTl、P2l、P27、Nestin表達(dá)的改變。電鏡觀察足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。激光微切割方法獲取腎小球，通過(guò)Real—timePCR觀

2、察小球內(nèi)Integrinβ1、nephrin、a-actinin4的mRNA水平的改變。結(jié)果：1、足細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的改變：1)個(gè)別IgA腎病患者足細(xì)胞重新表達(dá)P21；2)較正常人相比，IgA腎病患者足細(xì)胞上P27表達(dá)明顯降低(0．71±0．12vs0．91±0．07，P<0．05)。2、足細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白的改變：1)IgA腎病患者足細(xì)胞Nestin的表達(dá)較正常人明顯降低(17．6％±0．04vs13．4％±0．04，P

3、小球內(nèi)Integrinβ1明顯增高(12．54±5．20vs1．02±0．30，P

4、A腎病中確實(shí)存在足細(xì)胞的損傷，主要表現(xiàn)為：足細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的改變；足細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白的改變；足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變和足細(xì)胞數(shù)目的減少。 第二部分IgA腎病中足細(xì)胞損傷的可能機(jī)制 目的：探討IgA腎病中補(bǔ)體系統(tǒng)和系膜區(qū)擴(kuò)張引起的腎小球形態(tài)改變與足細(xì)胞損傷的關(guān)系。 方法：免疫組化方法觀察腎小球內(nèi)C5b-9、CRl表達(dá)的改變，免疫熒光觀察C3染色及l(fā)aminin-C5b-9雙染。采用腎小球體視學(xué)研究方法觀察IgA‘腎

5、病患者的系膜區(qū)／絲球襻點(diǎn)密度比、腎小球體積、腎小球絲球襻表面積，同樣觀察WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和足突寬度(FPW)。 結(jié)果：1、補(bǔ)體激活與足細(xì)胞：1)IgA腎病腎小球內(nèi)存在C3的明顯沉積，且與WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)呈明顯負(fù)相關(guān)(F=5．80,P=0．0007)。2)腎小球內(nèi)CRl的表達(dá)明顯減少((0．15±0．09vs0．24±0．07，P<0．05)；且CRl的表達(dá)與WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)趨勢(shì)(r=0．3867,P=0．0510)。3)

6、。腎小球內(nèi)明顯伴有C5b-9的沉積，并證實(shí)確實(shí)攻擊足細(xì)胞，C5b-9的沉積與WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和CRl均呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0．447，P=0．0221；r=0．6712，P=0．0002，分別)。2、腎小球形態(tài)改變與足細(xì)胞：1)IgA腎病患者存在明顯的系膜區(qū)擴(kuò)張、小球體積肥大，系膜區(qū)的擴(kuò)張和小球體積肥大呈明顯正相關(guān)(P<0．05)。2)WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與腎小球系膜區(qū)／絲球襻點(diǎn)密度比、腎小球體積均呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0．6895,P=0．

7、0001；r=-0．6515,P=0．0002，分別)，但與腎小球絲球襻面積無(wú)明顯相關(guān)性。FPW及P21、P27蛋白水平的改變與補(bǔ)體及體視學(xué)各指標(biāo)均無(wú)明顯相關(guān)性。 結(jié)論：補(bǔ)體系統(tǒng)及系膜區(qū)的擴(kuò)張所導(dǎo)致的腎小球體積的增加可能參與了IgA。腎病中足細(xì)胞的損傷，引起足細(xì)胞數(shù)目的減少。 第三部分IgA腎病中足細(xì)胞損傷與蛋白尿及轉(zhuǎn)歸的關(guān)系目的：了解IgA腎病中足細(xì)胞損傷與蛋白尿的關(guān)系，是否與蛋白尿的轉(zhuǎn)歸有關(guān)。方法：35例伴有明

8、顯蛋白尿的IgA腎病患者，觀察尿蛋白、血壓、血肌酐、血清補(bǔ)體等臨床指標(biāo)，并隨訪18個(gè)月觀察其蛋白尿的轉(zhuǎn)歸。根據(jù)正常人的WTl陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，以95％的可信區(qū)間，將其分為足細(xì)胞數(shù)目減少組(Podocytopenia組，即足細(xì)胞數(shù)目≤17個(gè)／小球)和足細(xì)胞數(shù)目正常組(Normal組，即足細(xì)胞數(shù)目>17個(gè)／小球)。 結(jié)果：1)Logistic多因素回歸分析提示血肌酐、足細(xì)胞的足突寬度(FPW)、WTl陽(yáng)性足細(xì)胞數(shù)與24小時(shí)尿蛋白定量存在一

9、定的相關(guān)性(Coef=0．0324P=0．0300：Coef=0．0008，P=0．0260；Coef=-0．1633，P=0．0320；分別)。2)單因素分析結(jié)果亦提示：足突融合程度(FPW)及IntegrinB1的mRNA水平均與蛋白尿呈明顯相關(guān)性(r=0．6739,P=0．0082，P=0．036)。3)足細(xì)胞數(shù)目減少組與足細(xì)胞數(shù)目正常組的蛋白尿轉(zhuǎn)歸存在明顯差異，足細(xì)胞數(shù)目減少組蛋白尿下降程度明顯減少(P<0．05)。4)足突融合