農(nóng)桿菌介導(dǎo)芝麻轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因的研究.pdf

1、芝麻（Sesamum indicum L.）隸屬于胡麻科胡麻屬，是一年生草本植物，也是世界上最古老的油料作物之一。芝麻籽、芝麻油是重要的食品工業(yè)原料。芝麻，尤其是黑芝麻在醫(yī)療保健方面也有重要作用。因此選育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有抗蟲性狀的芝麻新品種已經(jīng)成為芝麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展的必然要求。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因技術(shù)為芝麻新品種的培育提供了新的途徑。本研究以晉芝3號(hào)為實(shí)驗(yàn)材料，以質(zhì)粒pBI101-Chi-Bmk為載體，采用土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)芝麻進(jìn)行了外

2、源雙價(jià)抗蟲基因的轉(zhuǎn)化，旨在獲得具有抗蟲性狀的芝麻新品種，并為芝麻新品種的培育提供技術(shù)支持。本研究的內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、本研究以芝麻為試驗(yàn)材料，研究了不同外植體、不同激素濃度、不同濃度配比等對(duì)芝麻再生體系的影響。結(jié)果表明:以5-8天無菌苗的下胚軸為外植體，在MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L培養(yǎng)基上可誘導(dǎo)分化出較高頻率的不定芽;在1/2MS+NAA0.1 mg/L培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根率可達(dá)100％。
　　2、

3、本試驗(yàn)探索了農(nóng)桿菌狀態(tài)、菌液濃度、共培養(yǎng)條件和時(shí)間以及轉(zhuǎn)化受體對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化的影響。結(jié)果表明:處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的農(nóng)桿菌，當(dāng)菌液濃度OD600達(dá)到0.4～0.6時(shí)，對(duì)5-8天無菌苗的下胚軸莖段的外植體進(jìn)行侵染，并在黑暗條件下共培養(yǎng)2天，其轉(zhuǎn)化效率較高，可達(dá)30.52％。
　　3、本試驗(yàn)對(duì)轉(zhuǎn)化芝麻植株進(jìn)行PCR檢測(cè)，檢測(cè)出了含有目的基因的特異擴(kuò)增條帶，證明外源基因已經(jīng)導(dǎo)入芝麻受體細(xì)胞中。對(duì)田間自然蟲害發(fā)生情況進(jìn)行了觀察，轉(zhuǎn)基因植株與未轉(zhuǎn)基因