含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液對(duì)大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:研究含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液對(duì)大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法:采用隨機(jī)數(shù)字表法，將24只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組（S組）、乳酸鈉林格氏液灌注組（RL組）、含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液灌注組（HRL組），每組8只。將氫氣加入乳酸鈉林格氏液中制成含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液。S組僅接受開(kāi)關(guān)腹操作。RL組和HRL組阻斷全肝血流后，門(mén)靜脈穿刺作為流入道，肝下下腔靜脈作為流出道，分別接受4℃乳酸鈉林格氏

2、液和4℃含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液灌注(6～8 mL/min)，時(shí)間為20 min。恢復(fù)灌注6h后經(jīng)肝下下腔靜脈采集血樣，測(cè)定血清轉(zhuǎn)氨酶ALT、AST，細(xì)胞因子TNF-α和IL-6水平;切取肝組織，采用硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA水平、黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD水平，免疫組化法檢測(cè)肝組織活化的caspase-3表達(dá)水平，TUNEL法檢測(cè)肝臟組織細(xì)胞凋亡情況，HE染色后觀察肝組織形態(tài)學(xué)變化，半定量PCR法檢測(cè)肝組織NF-κB mRNA表達(dá)水平。采

3、用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:再灌注6h后，HRL組肝組織病理學(xué)損傷較RL組減輕。與S組比較，RL組和HRL組血清ALT、AST、TNF-α和IL-6水平升高，肝組織MDA水平、活化的caspase-3表達(dá)和凋亡細(xì)胞百分比升高，肝組織SOD水平降低，肝組織NF-κBmRNA表達(dá)水平升高(P＜0.05或0.01

4、);與RL組比較，HRL組血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平降低，肝組織MDA水平、活化的caspase-3表達(dá)和凋亡細(xì)胞百分比降低，肝組織SOD水平升高，肝組織NF-κB mRNA表達(dá)水平降低(P＜0.05或0.01)。
　　結(jié)論:1、本研究采用的大鼠肝臟冷缺血再灌注模型包含冷灌注、再?gòu)?fù)流過(guò)程，能模擬肝移植供肝灌注、再植過(guò)程。再灌后6h后，轉(zhuǎn)氨酶升高，肝組織病理學(xué)損傷，提示建模成功;2、應(yīng)用含飽和氫氣乳酸鈉林格氏液后，