雙環(huán)鉑誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、[目的]
　　雙環(huán)鉑，是由我國(guó)科研人員自主研發(fā)的一類鉑類抗癌新藥，它是由一分子卡鉑和一分子1，1-環(huán)丁二羧酸通過(guò)氫鍵相互作用而組成，與目前傳統(tǒng)的鉑類抗癌藥物（如:順鉑，卡鉑）相比，雙環(huán)鉑有著水溶性好，毒副作用低的特點(diǎn)，而且對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有較好的抗腫瘤活性，它是一種有希望的新一類鉑類抗癌藥物。本研究一方面對(duì)雙環(huán)鉑誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞凋亡的具體作用機(jī)制進(jìn)行探討，另一方面我們又與傳統(tǒng)鉑類抗癌藥卡鉑進(jìn)行對(duì)比，探討兩者之間在抗腫瘤機(jī)制

2、中是否存在差異。
　　[方法]
　　以人肝癌細(xì)胞株HepG2為研究對(duì)象;用MTT法檢測(cè)雙環(huán)鉑及卡鉑對(duì)肝癌細(xì)胞株HepG2的細(xì)胞毒作用;用Annexin V/PI雙染法分析細(xì)胞凋亡率;以JC-1為探針，流式細(xì)胞儀檢測(cè)線粒體膜電位(△ψm);以DCFH-DA為探針，流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平;通過(guò)Western blotting測(cè)定細(xì)胞凋亡及生存通路相關(guān)蛋白的表達(dá)變化

3、。
　　[結(jié)果]
　　在一定濃度下雙環(huán)鉑能抑制肝癌細(xì)胞HepG2的生長(zhǎng)增殖并呈濃度依賴性地增加細(xì)胞的凋亡率;而且進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)雙環(huán)鉑使與凋亡通路相關(guān)的一些因素發(fā)生改變，如膜電位(△ψm)的降低，釋放入胞漿的細(xì)胞色素C增多，caspase-8、caspase-9、caspase-3及PARP的裂解活化;進(jìn)一步的研究還表明，雙環(huán)鉑還能影響B(tài)cl-2家族蛋白的水平變化。另外，我們還發(fā)現(xiàn)雙環(huán)鉑使胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生增多，并且加入抗氧化劑