2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討Wnt/β-catenin信號通路在HBx基因體外誘導(dǎo)大鼠卵圓細胞惡化過程中的作用,為闡明HBx基因和卵圓細胞在肝癌發(fā)生過程中的作用和機制奠定基礎(chǔ)。
   方法:建立轉(zhuǎn)染HBx基因并表達穩(wěn)定的卵圓細胞系(pEGFP-HBx-LE/6),用LE/6卵圓細胞及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pEGFP質(zhì)粒的LE/6卵圓細胞(pEGFP-LE/6)作為對照細胞,運用Real-time PCR、細胞免疫化學染色法、細胞免疫熒光法和Western bl

2、ot等技術(shù)觀察和檢測上述三種細胞在Wnt/β-catenin信號通路中關(guān)鍵因子β-catenin、cyclin D1及c-myc的表達差異,并分別運用倒置相差顯微鏡和透射電鏡、MTT法和流式細胞術(shù)觀察和檢測上述三種細胞的細胞形態(tài)、細胞增殖和細胞周期的變化。設(shè)計并且合成特異的β-catenin的siRNA干擾序列片段,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pEGFP-HBx-LE/6卵圓細胞,細胞計數(shù)法檢測轉(zhuǎn)染干擾片段后實驗組與對照組細胞的增殖情況。
  

3、 結(jié)果:與對照組細胞相比,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HBx基因的卵圓細胞(pEGFP-HBx-LE/6)明顯上調(diào)Wnt/β-catenin信號通路中的關(guān)鍵因子β-catenin,從而導(dǎo)致下游靶基因cyclin D1及c-myc的表達上升(p<0.05);光鏡和電鏡結(jié)果示pEGFP-HBx-LE/6卵圓細胞的體積增大且細胞核具有不規(guī)則異型;MTT法檢測細胞增殖結(jié)果顯示pEGFP-HBx-LE/6卵圓細胞的增殖較對照組細胞快;流式細胞儀檢測細胞周期結(jié)果顯示相

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