外源物質(zhì)提高靈芝酸產(chǎn)量的應(yīng)用效果研究.pdf

1、靈芝是一種藥用真菌，兩千多年前就被應(yīng)用到疾病的預(yù)防與治療。靈芝的主要生物學(xué)組成是靈芝多糖和靈芝三萜類化合物。目前，靈芝酸生產(chǎn)主要來源于靈芝子實體，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足社會市場需求。隨著對靈芝深層發(fā)酵技術(shù)研究表明，用發(fā)酵法生產(chǎn)靈芝酸可以直接獲得大量的靈芝酸，靈芝菌絲體可以用來提取靈芝酸，也可以作為副產(chǎn)品用于提取其他成分或直接用于保健品的加工。本課題研究了如何提高深層發(fā)酵靈芝酸產(chǎn)量。
　　首先，本論文研究了在液體培養(yǎng)基中添加不同添加量的有機碳

2、源進(jìn)行培養(yǎng)基改良，結(jié)果表明，培養(yǎng)基玉米粉添加量為4g/L時，菌絲體干重和靈芝酸產(chǎn)量分別達(dá)到最大值，較對照組提高1.11和1.26倍；培養(yǎng)基小麥粉添加量為10g/L時，干重和產(chǎn)量分別比對照組提高0.73和0.87倍；培養(yǎng)基蕎麥粉添加量為7g/L時，干重和產(chǎn)量分別比對照組提高0.97和1.15倍。培養(yǎng)基玉米粉添加量為7g/L時，靈芝酸含量達(dá)到最大值23.538mg/g。培養(yǎng)基中玉米粉添加量為4、5、7、10g/L時，靈芝酸產(chǎn)量差異不顯著。從

3、生產(chǎn)實際考慮，應(yīng)使用4g/L的玉米粉優(yōu)化培養(yǎng)基。
　　其次，采用單因素法研究了褪黑素、Cu2+、Ca2+對靈芝深層發(fā)酵的影響，結(jié)果表明，加入20μmol/L褪黑素時，靈芝酸產(chǎn)量較對照組提高73％，達(dá)到244.528mg/L；加入100μmol/L硫酸銅時，靈芝酸產(chǎn)量較對照組提高57%，達(dá)到207.773mg/L。加入氯化鈣濃度為100、200μmol/L時，靈芝酸產(chǎn)量較對照組提高29%、26%，達(dá)到187.061mg/L、182.

4、407mg/L。以褪黑素為外源物質(zhì)研究了褪黑素添加時間與收獲時間對靈芝深層發(fā)酵的影響，結(jié)果得出最佳培養(yǎng)方案為：培養(yǎng)第4d加入20μmol/L褪黑素，第9d收獲。
　　再次，培養(yǎng)基中玉米粉添加量為4g/L，加入20μmol/褪黑素，以加入褪黑素時間、收獲時間為變量進(jìn)行試驗。結(jié)果表明，最佳培養(yǎng)方案為第4d添加外源物質(zhì)第8d收獲。以此方案為基礎(chǔ)，應(yīng)用響應(yīng)面法研究氯化鈣、硫酸銅、褪黑素之間相互作用對靈芝深層發(fā)酵菌絲體生物量和靈芝酸產(chǎn)量的影

5、響。結(jié)果表明，氯化鈣、硫酸銅、褪黑素對菌絲體生物量的交互影響呈簡單的線性關(guān)系；對靈芝酸產(chǎn)量的交互影響并不是簡單的線性關(guān)系，二次項對靈芝酸產(chǎn)量也有顯著影響。靈芝菌絲體生物量（Y）、靈芝酸產(chǎn)量（IGA）與氯化鈣、硫酸銅、褪黑素之間的線性回歸關(guān)系為：
　　Y=38.41-0.50A+2.11B+0.96C
　　IGA=406.75+3.77A+10.33B+9.08C-12.26AB-0.57AC-27.46BC+13.33A2+