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文檔簡介
1、提高分離能力和改進(jìn)分離的選擇性一直是分離科學(xué)中具有挑戰(zhàn)性的研究工作,而高效液相色譜和高效毛細(xì)管電泳則是分離科學(xué)中最重要的兩個工具。高效液相色譜由于具有較高的分離能力和很好的重現(xiàn)性,己成為生命科學(xué)、藥物科學(xué)等領(lǐng)域不可缺少的分析手段。近十年來,高效毛細(xì)管電泳以其分離效率高、分析速度快、所需樣品少以及消耗低等優(yōu)勢,展示了其在分析領(lǐng)域中巨大的應(yīng)用潛力,己成為高效液相色譜的有力補(bǔ)充。
本論文即選擇高效毛細(xì)管電泳和高效液相色譜這兩種旨在提
2、高分離能力的工具,建立了兩種高效、快速、穩(wěn)定、可靠的氨基酸分離方法,對中藥試劑中的氨基酸成分進(jìn)行了含量測定,并全面考察和驗證了方法的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度。
本論文由以下3章內(nèi)容組成:
第一章對高效液相色譜技術(shù)和高效毛細(xì)管電泳技術(shù)的理論、分離模式及在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述;對氨基酸的分析方法及主要的柱前衍生試劑進(jìn)行了綜述。
第二章采用鄰苯二甲醛(OPA)為衍生試劑,構(gòu)建了一個氨基酸柱前衍生的高效液相色譜分析系統(tǒng)
3、。在30min內(nèi),將中藥試劑中的13種氨基酸達(dá)到基線分離;優(yōu)化了衍生反應(yīng)條件和色譜分離條件,包括OPA衍生試劑與氨基酸的衍生比例、梯度洗脫程序、紫外檢測波長等。分離效果較好,具有良好的線性關(guān)系和很高的精密度,各氨基酸衍生物的峰面積RSD值除賴氨酸(11.6%)外,其余均在0.4%~6.1%之間。OPA衍生氨基酸反應(yīng)速度快,HPLC快速、高效的特點,使得該方法具有普遍的適用性。
第三章以異硫氰酸熒光素(FITC)為衍生試劑,建立
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