吸煙大鼠生精細(xì)胞凋亡與bcl-2、bax表達(dá)的相關(guān)性.pdf

1、目的:探討吸煙對(duì)大鼠生精細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax表達(dá)水平的影響,以及生精細(xì)胞凋亡與凋亡調(diào)控蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性。
　　方法:用60日齡SD雄性大鼠50只建立被動(dòng)吸煙大鼠模型,隨機(jī)分為A組(1枝)、B組(2枝)、C組(4枝)、D組(2枝、戒煙)、E組(0枝),每組10只,均每日兩次,每次30min進(jìn)行染毒,持續(xù)4周后處死;D組戒煙后兩周再處死。留取睪丸稱(chēng)濕重,常規(guī)切片HE染色觀(guān)察大體結(jié)構(gòu);應(yīng)用TUNEL檢測(cè)睪丸中生精

2、細(xì)胞的凋亡,采用免疫組化(S-P法),檢測(cè)Bcl-2、Bax在大鼠睪丸中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重在各組間無(wú)明顯差異,而大鼠睪丸的重量染毒組明顯低于對(duì)照組。大鼠睪丸常規(guī)切片HE染色顯示,對(duì)照組睪丸生精上皮中生精細(xì)胞排列有序,形態(tài)正常;而染毒組生精上皮內(nèi)生精細(xì)胞排列紊亂,生精細(xì)胞和精子數(shù)量減少,可見(jiàn)較多的多核巨細(xì)胞;隨著染毒量的增加,生精上皮的厚度有減少的趨勢(shì)。C組中部分大鼠睪丸曲細(xì)精管中的各級(jí)生精細(xì)胞消失殆盡

3、,表現(xiàn)為唯支持細(xì)胞綜合癥。染毒后戒毒的D組在生精上皮厚度、生精細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面,均較同劑量的染毒組B組有所改善。
　　2.對(duì)照組存在少量的生精細(xì)胞凋亡;染毒組相較于對(duì)照組,凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增多,凋亡指數(shù)(AI)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而在各染毒組間,A、B組凋亡指數(shù)大于C、D組,其差異有顯著性。C、D組間凋亡指數(shù)無(wú)顯著性差異。
　　3.免疫組化顯示, Bax在染毒組中的表達(dá)明顯要高于對(duì)照組,差異有顯著性,且其表達(dá)強(qiáng)度與吸煙

4、的枝數(shù)呈正相關(guān); Bcl-2在各組間表達(dá)存在差異,隨染毒劑量增加,表達(dá)呈下降趨勢(shì),然而差異未發(fā)現(xiàn)顯著性。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)分析,細(xì)胞凋亡指數(shù)與Bax的表達(dá)強(qiáng)度之間存在著中度正相關(guān)關(guān)系;與Bcl-2之間則存在著輕度負(fù)相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)論:
　　1.吸煙可以引起睪丸生精細(xì)胞的凋亡以及睪丸體積減低,吸煙劑量越大作用越明顯。戒煙有助于生精功能的恢復(fù)。
　　2. Bcl-2表達(dá)水平下降而B(niǎo)ax的表達(dá)升高,引發(fā)大鼠睪丸生精