蚯蚓纖溶酶增加人食管癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞對(duì)放射線敏感性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討蚯蚓纖溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme，EFE)對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803的放射增敏作用及機(jī)制。 方法： (1)MTT法觀察EFE作用24小時(shí)(設(shè)立6個(gè)濃度組：0uku/ml、0.4uku/ml、1.0uku/ml、2.0uku/ml、4.0uku/ml、6.0uku/ml)，對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803的生長(zhǎng)抑制作用。 (2

2、)克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察EFE的放射增敏作用(設(shè)立對(duì)照組、0.1uku/mlEFE組、0.3uku/m EFE組)，分組處理、照射后，分別觀察EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803細(xì)胞克隆形成率的影響。 (3)流式細(xì)胞術(shù)觀察EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803細(xì)胞周期分布的影響(設(shè)立對(duì)照組、EFE組、射線組、EFE+射線組)。 (4)RT-PCR法檢測(cè)EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌

3、細(xì)胞株MGC803內(nèi)硒谷胱甘肽過氧化物酶基因表達(dá)的影響(設(shè)立對(duì)照組、EFE組、射線組、EFE+射線組)。 結(jié)果: (1)MTT結(jié)果提示，EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803有生長(zhǎng)抑制作用，抑制率隨EFE濃度增長(zhǎng)而上升。EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109的半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)為3.8uku/ml； MGC803細(xì)胞株的半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)為2.5 uku/ml。 (2)克隆形成

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，0.1uku/ml、0.3uku/ml的EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109有放射增敏效應(yīng)，放射增敏比分別為1.37和1.59。0.1uku/ml、0.3uku/ml的EFE對(duì)胃癌細(xì)胞株MGC803的放射增敏比分別為1.06和1.14。 (3)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果提示，射線照射誘發(fā)食管癌細(xì)胞株ECA109出現(xiàn)G<,2>期阻滯；EFE與射線聯(lián)合作用時(shí)，細(xì)胞G<,2>/M期比例下降更顯著。射線照射誘發(fā)胃癌細(xì)胞株MGC803出現(xiàn)G

5、<,1>期阻滯，而EFE單獨(dú)或與射線聯(lián)合作用，對(duì)細(xì)胞的G<,1>期阻滯均無明顯影響。 (4)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果提示，射線可誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803胞內(nèi)的SeGPx mRNA表達(dá)下調(diào)，而EFE能夠增強(qiáng)兩種細(xì)胞內(nèi)射線誘導(dǎo)的SeGPx mRNA表達(dá)下調(diào)作用。 結(jié)論: EFE對(duì)食管癌細(xì)胞株ECA109、胃癌細(xì)胞株MGC803有生長(zhǎng)抑制作用；EFE能夠增加食管癌細(xì)胞ECA109、胃癌細(xì)胞株MG