感冒清熱顆粒揮發(fā)油成分的提取工藝及含量測(cè)定方法研究.pdf

1、感冒清熱顆粒由荊芥穗、薄荷、防風(fēng)、柴胡、紫蘇葉、葛根、桔梗、苦杏仁、白芷、苦地丁、蘆根11味藥材組成,具有疏風(fēng)散寒,解表清熱的功能,用于風(fēng)寒感冒、頭痛發(fā)熱、惡寒身痛、鼻流清涕、咳嗽咽干的治療,現(xiàn)收載于《中國(guó)藥典》2010版(一部)。
　　已有研究表明,揮發(fā)油成分是感冒清熱顆粒治療風(fēng)寒感冒的主要有效部位,具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌抗病毒、解熱、鎮(zhèn)咳等作用。國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,方中荊芥穗、薄荷、紫蘇葉需提取揮發(fā)油成分入藥。目前,該產(chǎn)品揮發(fā)油提取

2、工藝為蒸餾法,存在提取時(shí)間長(zhǎng)、提取效率低等缺陷,且沒(méi)有含量控制方法。為提高感冒清熱顆粒揮發(fā)油提取工藝水平和質(zhì)量控制水平,開(kāi)展本課題研究。
　　目的:
　　1.研究制定感冒清熱顆粒揮發(fā)油提取新工藝。
　　2.建立感冒清熱顆粒揮發(fā)油中薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛三種指標(biāo)性成分的含量測(cè)定方法。
　　方法:
　　1.感冒清熱顆粒揮發(fā)油提取新工藝的研究
　　以提油量為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)薄荷、荊芥穗、紫蘇葉三味藥材單獨(dú)提

3、取揮發(fā)油和混合提取揮發(fā)油的比較研究,優(yōu)選提取方式。以提油量為指標(biāo),通過(guò)蒸餾法(SD)和蒸餾-精餾耦合法(WER)兩種揮發(fā)油提取工藝的對(duì)比研究,確定提取工藝。
　　通過(guò)對(duì)加水量、浸泡時(shí)間、提取時(shí)間三個(gè)影響因素不同水平的組合考察,設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),以提油量為評(píng)價(jià)指標(biāo),優(yōu)選出較優(yōu)的混合藥材WER提取工藝。并通過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)和放大實(shí)驗(yàn),證明該方法的可重復(fù)性和工藝成熟性。在正交實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,通過(guò)測(cè)定所提揮發(fā)油中薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛三種指標(biāo)性成分的

4、含量,評(píng)價(jià)WER提取工藝不同工藝參數(shù)對(duì)所提揮
　　發(fā)油中活性成分的影響。
　　2.感冒清熱顆粒揮發(fā)油中薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛三種指標(biāo)性成分的含量測(cè)定方法。
　　采用氣相色譜(GC)法,通過(guò)對(duì)氣相色譜柱型號(hào)、程序升溫條件、內(nèi)標(biāo)物的選擇,確定符合要求的色譜條件。
　　通過(guò)專(zhuān)屬性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、加樣回收試驗(yàn)、線性范圍試驗(yàn)進(jìn)行方法學(xué)考察。
　　通過(guò)五批樣品檢測(cè)驗(yàn)證所建立的含量測(cè)定方法的可

5、行性。
　　結(jié)果:
　　1.根據(jù)三種藥材單獨(dú)提取6h的提油量,依處方比例計(jì)算得油量合計(jì),WER法和SD法分別為2.43mL和2.12mL;三種藥材混合提取6h,WER法和SD法分別為2.95mL和2.88mL?？梢?jiàn),感冒清熱顆粒揮發(fā)油的提取,以三種藥材混合提取為宜,且WER法優(yōu)于SD法。
　　2.正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,WER工藝提取感冒清熱顆粒揮發(fā)油的影響因素:提取時(shí)間>浸泡時(shí)間>加水量,優(yōu)選得最佳提取工藝參數(shù)為A3B2C

6、2,即加7倍量水,浸泡90min,提取3h。
　　3.驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)和放大性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)顯示,WER工藝提取感冒清熱顆粒揮發(fā)油方法重復(fù)性好,工藝成熟,具有良好的產(chǎn)業(yè)化實(shí)施前景。
　　4.確定DM-FFAP彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);FID檢測(cè)器;載氣:N2;流速:1 mL/min;進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度:250℃;柱溫:初始溫度是120℃,然后以2℃/min的速度升溫至140℃,再以15℃/min的速度升溫

7、至220℃,保持5 min;進(jìn)樣量:1μL;分流比20:1;理論塔板數(shù)按薄荷腦計(jì)算應(yīng)不低于110000,薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛分別與其他相鄰峰的分離度大于1.5。
　　5.通過(guò)方法學(xué)考察,證明該含量測(cè)定方法專(zhuān)屬性強(qiáng),薄荷腦在34.034～343.04mg/mL范圍內(nèi),胡薄荷酮在88.998～889.98mg/mL范圍內(nèi),紫蘇醛在19.2636～192.636mg/mL范圍內(nèi)與峰面積比線性關(guān)系良好。方法精密度良好,峰面積的RSD值

8、分別為:薄荷腦0.88％、胡薄荷酮0.97%、紫蘇醛0.97%。供試品溶液中的薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛在室溫下23 h內(nèi)穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好,薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛RSD值分別是0.74%、0.61%、1.66%。薄荷腦、胡薄荷酮、紫蘇醛的平均回收率分別為99.00%、102.13%、97.46%,RSD分別為:1.81%、1.71%、1.87%。
　　6.通過(guò)驗(yàn)證5批揮發(fā)油樣品,證明該含量測(cè)定方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求。
　

9、　結(jié)論:
　　通過(guò)本課題的研究,制定了WER法提取感冒清熱顆粒揮發(fā)油生產(chǎn)新工藝,工藝參數(shù)為:藥材破碎,按處方比例稱(chēng)量、混合,采用WER法,加7倍水量,浸泡90min,提取3h。該工藝提取感冒清熱顆粒的提油量與傳統(tǒng)工藝(SD)比較,在提油量基本一致的情況下,提取時(shí)間由5h降低到3h,具有明顯的優(yōu)勢(shì)。通過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)和放大實(shí)驗(yàn)研究,證明該項(xiàng)新工藝穩(wěn)定性好,具有產(chǎn)業(yè)化實(shí)施的前景。
　　研究制定的感冒清熱顆粒揮發(fā)油中薄荷腦、胡薄荷酮、紫