shRNA沉默ANGPTL4表達(dá)對(duì)大腸癌HT29細(xì)胞的生物學(xué)行為影響的研究.pdf

1、ANGPTL4為血管生成素相關(guān)新基因,起初命名為pp1158,現(xiàn)已由人類基因(The Human Genome Organisation,HUGO)統(tǒng)一命名為ANGPTL4(angiopoietin-like4)。該基因是全長(zhǎng)基因,編碼406個(gè)氨基酸,預(yù)計(jì)分子量為45.2 kDa。ANGPTL4為一分泌蛋白,它的編碼基因定位于19p13.3染色體。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)ANGPTL4在肝癌,肺癌,乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中均起重要作用,但是其對(duì)大腸癌

2、的作用卻尚未見報(bào)道。
　　 目的：檢測(cè)ANGPTL4在大腸癌病例中的表達(dá)情況以及探討ANGPTL4基因在大腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)的作用機(jī)制。
　　 方法：用半定量RT-PCR檢測(cè)ANGPTL4在大腸癌病例組織與正常對(duì)照中的表達(dá)情況；用半定量RT-PCR檢測(cè)ANGPTL4在大腸癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況。通過shRNA體外轉(zhuǎn)染,篩選穩(wěn)定細(xì)胞株,獲得ANGPTL4沉默的大腸癌細(xì)胞株,觀察沉默ANGPTL4對(duì)細(xì)胞表型的影響,包

3、括細(xì)胞的增殖能力,集落形成能力,細(xì)胞遷移能力等。
　　 結(jié)果：ANGPTL4在41.5％的臨床大腸癌標(biāo)本中表達(dá),較正常組織中(19.5％)表達(dá)升高。ANGPTL4在多數(shù)大腸癌細(xì)胞株中表達(dá)。沉默ANGPTL4的大腸癌HT29細(xì)胞與對(duì)照細(xì)胞相比,集落形成能力增強(qiáng),但細(xì)胞遷移能力降低,可能與促進(jìn)VASP的磷酸化失活從而影響細(xì)胞偽足的形成有關(guān)。
　　 結(jié)論：ANGPTL4在大腸癌中表達(dá)升高,ANGPTL4可能在大腸癌的發(fā)生發(fā)展中