內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路參與不同缺氧條件下主動脈內(nèi)皮細胞凋亡的研究.pdf

1、目的:
　　觀察不同缺氧條件下內(nèi)皮細胞凋亡情況及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子表達變化情況,探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路參與不同缺氧條件下主動脈內(nèi)皮細胞凋亡的相關(guān)機制。
　　方法:
　　24只SPF級wistar大鼠隨機分成3組,每組8只(n=8):常氧對照組(NC組)、間歇缺氧組(IH組)、持續(xù)缺氧組(PH組)。通過免疫組織化學(xué)方法檢測主動脈弓處內(nèi)皮細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號分子BIP、CHOP、caspase12的蛋白表達,TUNEL法檢測主動脈

2、弓處內(nèi)皮細胞凋亡情況;體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,隨機分組:常氧對照組(NC1組)、常氧對照+抑制劑組(NC1+TUDCA組)、間歇缺氧組(IH1組)、間歇缺氧+抑制劑組(IH1+TUDCA組)、持續(xù)缺氧4H組(PH1組)、持續(xù)缺氧4H+抑制劑組(PH1+TUDCA組)、持續(xù)缺氧12H組(PH2組)、持續(xù)缺氧12H+抑制劑組(PH2+TUDCA組)。通過流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡情況,real-timePCR檢測各組細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子BI

3、P、CHOP、caspase12的mRNA表達水平變化。
　　結(jié)果:
　　體內(nèi)、外研究結(jié)果均顯示,與正常對照組相比,間歇缺氧組及持續(xù)缺氧組內(nèi)皮細胞凋亡率增加(P<0.05),與此同時,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子BIP、CHOP、caspase12表達明顯增高(P<0.05),其中,同等時長下,間歇缺氧組內(nèi)皮細胞凋亡率及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子表達增高較持續(xù)缺氧組明顯(P<0.05)。加入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑TUDCA后,內(nèi)皮細胞凋亡率和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子