纈沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的抑制作用.pdf

1、目的：
　　糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病的常見(jiàn)并發(fā)癥，同時(shí)也是糖尿病患者死亡的一個(gè)主要原因，其發(fā)病率一直呈逐年升高趨勢(shì)，目前已成為我國(guó)導(dǎo)致終末期腎病的第二大因素。近年的研究認(rèn)為，DN是一種慢性炎癥性疾病，但其炎癥反應(yīng)發(fā)生的原因尚未明確。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress,ERS）已被證實(shí)與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，可能在DN的炎癥反應(yīng)中起到一定作用。本研究擬通過(guò)構(gòu)建

2、糖尿病大鼠模型，探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及相關(guān)炎癥反應(yīng)在糖尿病大鼠腎臟損害中的作用及血管緊張素受體拮抗劑纈沙坦對(duì)DN大鼠腎臟中ERS及相關(guān)炎癥的影響。
　　方法：
　　34只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組（Con組，n=10只）、模型組（DM組，n=12只）、纈沙坦治療組（DM+V組，n=12只）。DM組、DM+V組大鼠腹腔注射STZ40mg/kg，制作糖尿病模型，各組大鼠給予普通飼料喂養(yǎng)，DM+V組每天用纈沙坦灌胃6周（10 mg/k

3、g），Con組及DM組只灌等量蒸餾水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)量大鼠體重、雙側(cè)腎臟重量，應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)ERS標(biāo)志蛋白GRP78及中性粒細(xì)胞趨化因子1（MCP-1）的蛋白表達(dá)及定位，Western blot方法檢測(cè)ERS相關(guān)蛋白P-IRE1α、JNK、P-JNK、NF-κB p65、P-NF-κB p65的蛋白表達(dá)水平，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)腎組織中JNK、NF-κB及炎癥因子MCP-1、TNFα、IL-1βmRNA表達(dá)變化，同

4、時(shí)觀察各組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量、血漿白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）等指標(biāo)的變化。
　　結(jié)果：
　　1、與Con組相比，DM組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量、BUN、Scr水平明顯升高（P<0.05），ALB明顯降低（P<0.05），與DM組相比，DM+V組24小時(shí)尿蛋白定量、BUN明顯降低（P<0.05），ALB明顯升高（P<0.05），Scr較DM組降低但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；
　　2、HE染

5、色光鏡下Con組腎組織未見(jiàn)明顯病理改變，DM組大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖肥大，系膜區(qū)增寬，系膜基質(zhì)聚積,腎小球基底膜增厚，腎小管上皮細(xì)胞廣泛空泡變性，并可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，DM+V組與DM組相比，系膜細(xì)胞增殖肥大、系膜基質(zhì)聚積、腎小管上皮細(xì)胞廣泛空泡變性均減輕；
　　3、免疫組化顯示Con組GRP78輕度表達(dá)、MCP-1幾乎無(wú)表達(dá)，與Con組相比，DM組GRP78、MCP-1表達(dá)明顯升高（P<0.05），且腎小管上皮細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，與D

6、M組相比，DM+V組GRP78、MCP-1表達(dá)明顯降低（P<0.05）；
　　4、與Con組相比，DM組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達(dá)水平明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組P-IRE1α、P-JNK、P-NF-κB p65蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.05），且P-JNK、P-NF-κB p65與P-IRE1α蛋白表達(dá)程度呈正相關(guān)（P<0.05）；
　　5、與Con組相比，DM組M

7、CP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFα mRNA表達(dá)明顯升高（P<0.05），與DM組相比，DM+V組MCP-1、IL-1β、NF-κB p65、TNFαmRNA表達(dá)明顯降低（P<0.05），3組間JNKmRNA表達(dá)變化無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、DN中存在ERS的激活，活化的膜蛋白P-IRE1α可能通過(guò)激活JNK及NF-κB炎癥信號(hào)通路引起炎癥反應(yīng)；
　　2、ANGII受體拮抗劑纈沙