左卡尼汀對高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞的保護作用.pdf

1、目的：原代培養(yǎng)新生大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞,建立高糖模型后,探討左卡尼汀對高糖條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞保護作用。
　　 方法：取出生后1-3d SD大鼠視網(wǎng)膜,0.25%胰蛋白酶消化制成不同大小細胞團的懸液,接種于包有多聚賴氨酸的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化,取7-9天細胞進行神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)免疫熒光鑒定。取8-10天的細胞進行試驗,實驗設計為5組:正常細胞培養(yǎng)組(對照組)、高糖模型組、高糖模型組+左卡尼汀

2、(50μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(100μmol/L)、高糖模型組+左卡尼汀(200μmol/L),用MTT法檢測細胞OD值來反映視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞活性,以電子自旋共振法(ESR)檢測各組一氧化氮(NO)及活性氧(ROS)的釋放來反映氧化應激程度。
　　 結果：免疫熒光顯示,培養(yǎng)的細胞大部分抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體反應陽性。MTT結果顯示高糖模型細胞活性顯著降低(P<0.05),左卡尼汀濃度100μmol/L,作用時間4