播娘蒿抗寒性鑒定及其CBF基因的克隆、序列分析和蛋白的表達(dá)純化.pdf

1、本文在研究播娘蒿和紫花苜蓿低溫脅迫生理特性的基礎(chǔ)上，克隆得到了播娘蒿的CBF基因，這對(duì)于以后進(jìn)行優(yōu)質(zhì)豆科牧草苜蓿的抗寒基因工程改造，擴(kuò)大苜蓿的種植面積，充分利用和治理高寒地區(qū)的荒地有著極其重要的作用。取得的主要成果： 1.隨著4℃冷處理，葉片的SOD活性呈先上升后下降趨勢(shì)，然后保持穩(wěn)定；脯氨酸含量隨冷處理時(shí)間呈增加趨勢(shì)；在高于-5℃低溫脅迫時(shí)，播娘蒿葉片的電導(dǎo)率呈緩慢增加，而低于-6℃時(shí)由于質(zhì)膜受到損傷播娘蒿葉片電導(dǎo)率顯著增加，

2、表明播娘蒿可以耐受-5℃的低溫。相對(duì)的，紫花苜蓿葉片在低于-4℃時(shí)葉片電導(dǎo)率急速上升，表明其只能耐受-3℃的低溫，各項(xiàng)指標(biāo)證明了播娘蒿擁有更高的抗寒性。 2.通過3'RACE和5'RACE的方法，得到播娘蒿CBF基因的844bp大小的序列。 3.通過改進(jìn)的5'RACE方法不僅克隆到播娘蒿CBF基因的5'端序列，并為以后克隆其它基因5'端的試驗(yàn)平臺(tái)奠定了基礎(chǔ)。 4.對(duì)克隆得到的播娘蒿CBF基因序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析