款冬花多糖提取純化工藝研究及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、本課題對陜南秦巴山區(qū)特產(chǎn)藥用植物款冬花多糖活性成分的提取、相關(guān)動力學、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定以及體外抗氧化性等方面進行了系統(tǒng)的研究。主要研究成果如下：
　　 (1)對款冬花多糖的水提法、超聲提取法兩種提取工藝進行了對比研究，并優(yōu)化了提取工藝參數(shù)。水提法優(yōu)化工藝條件為：提取溫度84℃，時間124min，液料比21(mL/g)，提取3次，在此優(yōu)化條件下，多糖提取率為1.862％；超聲提取法優(yōu)化工藝條件為：提取功率90W，溫度71℃，時間

2、40min，液料比25(mL/g)，提取3次，在此優(yōu)化工藝條件下，多糖提取率為2.204％。上述數(shù)據(jù)表明超聲提取法具有提取溫度低、時間短、提取率較高的優(yōu)點，但超聲法有可能會對多糖結(jié)構(gòu)造成一定的影響。
　　 (2)分別建立了款冬花多糖水提、超聲提取的動力學模型，并求得了在水提和超聲條件下，款冬花多糖的提取速率常數(shù)、相對萃余率、活化能、半衰期以及有效擴散系數(shù)等一系列的動力學參數(shù)。研究結(jié)果可為款冬花多糖的提取工藝條件優(yōu)化以及工藝設(shè)計提

3、供相應(yīng)的理論依據(jù)和參考。
　　 (3)研究了款冬花多糖的脫蛋白、脫色工藝，并對工藝條件進行了優(yōu)化。
　　 多糖脫蛋白工藝：通過對鹽酸法、三氯乙酸法、Sevage法和木瓜蛋白酶結(jié)合Sevage法四種方法的比較，木瓜蛋白酶結(jié)合Sevage法是一種較為理想的方法，該法優(yōu)化的工藝條件為：木瓜蛋白酶用量為2％，pH值7.0，酶解時間93min，酶解溫度65℃，再結(jié)合3次Sevage法脫蛋白，其蛋白脫除率為82.63％，多糖保留率為

4、87.83％。
　　 多糖脫色工藝：通過對活性炭法、雙氧水法、反膠束溶液法、大孔樹脂法四種脫色方法對比研究，得到了一條大孔樹脂吸附法脫除款冬花多糖色素的工藝路線，并求得了款冬花多糖色素的吸附動力學、熱力學等相關(guān)參數(shù)。通過靜態(tài)、動態(tài)吸附和解吸試驗表明：XD-5是脫除款冬花多糖色素的理想樹脂。色素脫除的優(yōu)化條件為：多糖的上樣濃度為5mg/mL，上樣量為2BV，流速為1.5BV/h；在此工藝條件下，款冬花多糖的脫色率為90.04％，多

5、糖保留率為85.38％，蛋白脫除率在前期基礎(chǔ)上為91.42％。
　　 (4)脫蛋白、脫色的款冬花多糖(FPI)經(jīng)DEAE-ecllulose柱和sephadexG-200柱分離，共得到了FPA、FPB、FPC三個多糖分級組分，并對產(chǎn)率較高的FPA、FPB進行了理化性質(zhì)研究。研究結(jié)果表明：FPA為含有糖醛酸的多糖，其多糖含量為93.1％，其中糖醛酸含量為10.7％；分子量為456.6KDal；單糖組成為甘露糖，葡萄糖，半乳糖；單糖

6、的摩爾比為：2.467∶1.158∶1；鍵型構(gòu)成主要為1→2鍵、1→鍵、1→6鍵、1→3等；1H-NMR譜圖分析表明表明其組成單糖為α、β構(gòu)型。
　　 FPB為單一多糖，其含量為99.2％；分子量為5.5KDal；單糖組成為甘露糖、葡萄糖；單糖的摩爾比為：1.798∶1；鍵型構(gòu)成主要為1→鍵、1→3和1→3,6鍵等，1H-NMR譜圖分析表明表明其組成單糖為β構(gòu)型。
　　 (5)抗氧化活性測定結(jié)果表明，款冬花多糖具有一定的