血必凈對肺移植缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：肺移植缺血再灌注損傷是肺移植早期肺功能障礙的主要原因，也是肺移植術(shù)后患者死亡的最主要原因。由于其發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，涉及因素很多，目前仍沒有很好的辦法預(yù)防肺移植術(shù)肺再灌注損傷的發(fā)生。而天然植物中有很多有效成分已被證實有強(qiáng)的抗氧化、擴(kuò)張血管、抗炎癥反應(yīng)等功效。如血必凈含有多種生物有效成分，主要包括：紅花黃色素A、川芎嗪、丹參素、阿魏酸、芍藥苷等。其中許多物質(zhì)已被發(fā)現(xiàn)有顯著的對抗炎癥介質(zhì)、清除自由基、抗氧化、改善微循環(huán)功能。這些特性可能對組

2、織的再灌注損傷發(fā)揮一定作用。因此本實驗擬觀察血必凈對肺再灌注損傷的保護(hù)作用。 方法 實驗采用新西蘭白兔40只，隨機(jī)分為血必凈組和LPD組。每組各20只，雌雄不拘。建立原位自體左肺移植再灌注模型。LPD組經(jīng)肺動脈灌注4℃ L2D液。血必凈組于術(shù)前2hr經(jīng)耳緣靜脈注入血必凈10ml，并在LPD液中加入5ml血必凈，其余實驗步驟同LPD組。肺血管阻斷2hr，同時冰鹽水保存。2hr后依次開放肺靜脈、左主支氣管和左肺動脈，恢復(fù)左肺

3、的血液灌注。再灌注2hr后分別采集左、右肺靜脈血液及肺組織(取未灌注的右肺組織作為正常對照組)。測定肺靜脈血氧分壓，TUNEL法測定凋亡細(xì)胞記數(shù)，測量肺濕干比，HE染色和電鏡觀察兩組肺組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變。肺組織超氧化物歧化酶(SOD)檢測：采用黃嘌呤氧化酶法．肺組織中丙二醛(MDA)檢測：硫代巴比妥酸比色法。肺組織髓過氧化物酶(MPO)檢測：采用光比較法。 結(jié)果 光鏡觀察結(jié)果顯示，在缺血灌注后LPD組肺組織嚴(yán)重的炎性細(xì)

4、胞浸潤及肺間質(zhì)高度淤血、水腫，肺泡腔內(nèi)滲出明顯，而血必凈組病變程度輕微。肺組織透射電鏡觀察示LPD組超微結(jié)構(gòu)病變較重，肺泡上皮細(xì)胞胞膜破裂，肺泡Ⅱ型細(xì)胞腫脹明顯，大量脫顆粒，胞漿稀疏。而血必凈組細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，無明顯水腫，肺泡上皮細(xì)胞形態(tài)輕度改變，細(xì)胞器結(jié)構(gòu)清晰可見。缺血再灌注后肺組織細(xì)胞凋亡計數(shù)結(jié)果：血必凈組AI為7.95±2.68，LPD組AI為11.36±3.81。肺濕/干重比：血必凈組5.69±0.23，LPD組6.78±0.

5、31。肺靜脈血?dú)鈾z測：血必凈組肺靜脈血氧分壓為58.9±9.3mmHg，LPD組肺靜脈血氧分壓45.3±8.7mmHg。血必凈組SOD為0.7632±0.1067U/mg．pro，LPD組為0.4254±0.0628 U/mg．pro(P<0.01)。血必凈組MDA測定結(jié)果為0.1685±0.051 lnmol/mg．pro， LPD組為0.4398±0.1026 nmol/mg．pro(P<0.01)。血必凈組MPO測定為0.18±0

6、.02△OD/min．g，LPD組為0.48±0.14△OD/min．g(P<0.01)。病理組織觀測和實驗檢測提示，血必凈有抗氧化作用，能減輕再灌注中氧自由基對肺組織的損傷。而且能降低肺組織局部的炎性反應(yīng)，減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞的損傷，降低毛細(xì)血管通透性，減輕組織局部水腫。血必凈能顯著降低肺再灌注中引起的細(xì)胞凋亡。血必凈對再灌注的肺組織功能有明顯的保護(hù)作用，能改善移植肺早期的氣體交換功能。 結(jié)論 血必凈能有效的