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文檔簡介
1、本論文利用病毒誘導(dǎo)的基因沉默技術(shù)和酵母雙雜交技術(shù),對這些cDNA片段進(jìn)行了篩選和功能研究。主要結(jié)果如下: 1.選擇了192個利用cDNA-AFLP分析技術(shù)獲得的差異表達(dá)的cDNA片段,用VIGS技術(shù)進(jìn)行了大規(guī)模的功能篩選。獲得了20個參與過敏反應(yīng)的cDNA片段,其中15個被沉默后,使Cf-4轉(zhuǎn)基因煙草的HR反應(yīng)減弱,另有5個被沉默后使HR反應(yīng)完全喪失,表明這5個基因在HR反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。 2.針對上述篩選出的20個cDNA片段
2、,通過PCR的方法已從番茄的全長cDNA文庫中獲得了其中的6個cDNA克隆,有兩個序列基本相同。它們的編碼蛋白分別與來源于辣椒的Bs2抗病基因編碼蛋白、擬南芥L19核糖體蛋白、擬南芥的一種GTP結(jié)合蛋白、擬南芥的一種TPR蛋白和甘薯的一種LRR(Leucine-RichRepeat)受體類蛋白激酶具有較高的同源性。 3.以RGL作為誘餌蛋白,采用酵母雙雜交方法,從番茄全長cDNA文庫中篩選出兩個與之互作的蛋白,分別命名為RGLIP-
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