X藥提取物抗乙肝病毒的藥效研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)X藥材提取物及95％乙醇提取物含藥血清的體外抗乙肝病毒和抗急性肝損傷作用研究，探討 X藥材提取物的抗乙型肝炎的藥效。
　　方法：1.將X藥材用95%乙醇進(jìn)行回流提取，再分別采用不同極性的有機(jī)溶劑進(jìn)行部位分離。2.采用MTT法及ELISA法測(cè)定X藥材各提取物對(duì)2.2.15細(xì)胞的毒性及其對(duì)2.2.15細(xì)胞分泌的乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝病毒e抗原（HBeAg）的抑制情況，以初步進(jìn)行抗乙肝病毒的體外藥效篩選，確定有效提

2、取物。3.急性毒性實(shí)驗(yàn)（最大耐受量試驗(yàn)—MTD試驗(yàn)），通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索出X藥材有效提取物最大耐受量，以此為依據(jù)給予一定數(shù)量的健康小鼠最大給藥容積灌胃，連續(xù)觀察兩周，記錄動(dòng)物中毒死亡情況，以此確定X藥材有效提取物的安全性。4.以急性毒性實(shí)驗(yàn)測(cè)得X藥材有效提取物的MTD為依據(jù)，應(yīng)用血清藥理學(xué)方法制備含藥血清，采用MTT法及ELISA法測(cè)定該有效提取物含藥血清對(duì)2.2.15細(xì)胞的毒性及其對(duì)2.2.15細(xì)胞分泌乙肝表面抗原(HBsAg）和乙肝病毒

3、e抗原（HBeAg）的抑制情況。5.抗急性肝損傷實(shí)驗(yàn)：1）用CCl4制造小鼠化學(xué)性肝損傷動(dòng)物模型，觀察X藥材有效提取物對(duì)小鼠血清AST、ALT含量的影響，并觀察肝組織病理變化；2）用BCG﹢LPS制造小鼠免疫性肝損傷的動(dòng)物模型，觀察X藥材有效提取物對(duì)血清AST、ALT含量的影響，并觀察肝組織病理變化。
　　結(jié)果：1.藥材用不同極性有機(jī)溶劑回流提取得到石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、95%乙醇提取物。2.除95%乙醇提取

4、物外，其余各部位2.2.15細(xì)胞的增殖抑制作用均較?。ǎ?0%），確定95%乙醇提取物為有效提取物。3.急性毒性結(jié)果顯示，X藥材95%乙醇提取物經(jīng)灌胃給藥的MTD為896g（生藥）/kg即16g（浸膏）/kg。4. MTT法結(jié)果顯示95%乙醇有效提取物含藥血清對(duì)2.2.15細(xì)胞的增殖有一定抑制作用，5天灌胃給藥制備含藥血清，其20%，10%，5%血清添加量對(duì)2.2.15細(xì)胞的抑制率分別為26.5%，12.9%，5.9%。5.（1）CCl

5、4制造小鼠化學(xué)性肝損傷動(dòng)物模型結(jié)果顯示，與模型組比較，95%乙醇提取物高劑量能顯著降低小鼠血清酶ALT活力（P<0.01）和AST活力（P<0.05），肝組織病理改變減輕。（2）BCG﹢LPS制造小鼠免疫性肝損傷的動(dòng)物模型結(jié)果顯示，與模型組比較，95%乙醇提取物高、低劑量均顯著降低小鼠血清酶ALT、AST活力（P<0.01），肝組織病理改變減輕。
　　結(jié)論：通過(guò)體外抗乙肝病毒的篩選，確定X藥材提取物95%乙醇提取物為有效提取物。體