抑癌基因FHIT治療惡性腦膠質(zhì)瘤的實驗研究.pdf

1、腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，約占所有原發(fā)性神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的60％。采用傳統(tǒng)的治療方法療效不佳，即使聯(lián)合手術、放療和化療，惡性膠質(zhì)瘤病人也往往會在首次發(fā)病后1-2年內(nèi)死亡。因而在腦膠質(zhì)瘤的治療探索中，人們嘗試用基因治療的方法來改善療效。脆性組氨酸三聯(lián)體基因(fragilehistidinetriad，F(xiàn)HIT)是1996年發(fā)現(xiàn)的一個新的抑癌基因。FHIT可能通過調(diào)控細胞周期誘導細胞凋亡、形成Fhit-底物復合物及與細胞微管結(jié)合等

2、途徑發(fā)揮抑癌的功能。許多研究發(fā)現(xiàn)，多種原發(fā)性腫瘤及腫瘤細胞株中都存在FHIT基因的異常。近年來人們開始將抑癌基因FHIT作為腫瘤的治療因子進行研究，結(jié)果顯示FHIT基因能抑制腫瘤的活性。 本課題有兩個目的：一是檢測人腦膠質(zhì)瘤中抑癌基因FHIT的突變情況；二是探討運用抑癌基因FHIT靶向治療人腦惡性膠質(zhì)瘤。課題由兩部分組成： 第一部分：通過對11例人腦膠質(zhì)瘤標本和4例正常人腦組織標本的FHIT基因進行檢測，了解人腦膠質(zhì)瘤中

3、是否存在抑癌基因FHIT的突變。結(jié)果顯示，11例膠質(zhì)瘤標本中有4例發(fā)生FHIT基因的點突變，突變率為36.4％，且高度惡性膠質(zhì)瘤的突變率為42.8％，高于低度惡性膠質(zhì)瘤的突變率(25％)。而正常腦組織無FHIT基因的突變。 第二部分：通過構(gòu)建人FHIT基因的真核細胞表達質(zhì)粒，之后轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤U87細胞，觀察其是否能抑制腫瘤細胞的生長；然后再將轉(zhuǎn)染有FHIT基因的U87細胞和對照的U87細胞接種到裸鼠皮下，在活體上進一步觀察抑癌基因

4、FHIT對膠質(zhì)瘤細胞的抑制作用。結(jié)果顯示，U87細胞轉(zhuǎn)染了FHIT基因24小時后的生長抑制率為22.2％，48小時后的生長抑制率為25.33％，明顯高于未轉(zhuǎn)染的及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的U87細胞；轉(zhuǎn)染了FHIT基因的U87細胞其48小時后的凋亡率為16.60％，而轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的U87細胞為3.51％，未轉(zhuǎn)染的U87細胞為2.80％，F(xiàn)HIT基因轉(zhuǎn)染組的凋亡率明顯高于其他兩組?；铙w實驗中，F(xiàn)HIT基因轉(zhuǎn)染組的移植瘤的體積和重量均明顯低于空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組和