Rs-afp-,1-基因和γ-tmt基因轉(zhuǎn)化花生及高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究.pdf

1、該研究選用6個(gè)花生栽培品種,研究了外植體類(lèi)型、生理狀態(tài)、基因型、培養(yǎng)基激素等因素對(duì)花生離體培養(yǎng)再生的影響,明確了器官發(fā)生途徑、胚胎發(fā)生途徑的技術(shù)條件和再生效率,建立了高效的花生葉片離體培養(yǎng)植株再生體系.首次發(fā)現(xiàn)了營(yíng)養(yǎng)器官組織培養(yǎng)誘導(dǎo)開(kāi)花現(xiàn)象,探討了關(guān)鍵技術(shù),提出了花生在試管內(nèi)開(kāi)花、自交、結(jié)實(shí)完成生活周期,加快育種進(jìn)程的新途徑.研究?jī)?yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)途徑進(jìn)行花生遺傳轉(zhuǎn)化的技術(shù)要素,建立了高效的遺傳轉(zhuǎn)化體系.利用這一體系,分別把抗真菌的γ-硫

2、堇蛋白(Rs-afp<,1>)基因和能提高維生素E活性的γ-維生素E甲基轉(zhuǎn)移酶(γ-tmt)基因?qū)牖ㄉ耘嗥贩N,獲得轉(zhuǎn)基因植株.通過(guò)對(duì)標(biāo)記基因、報(bào)告基因的PCR檢測(cè),以及對(duì)目的基因的PCR檢測(cè)、PCR-Southern-blotting分析和Southern-blotting分析,證明這些基因已整合到花生基因組中.據(jù)此,提出了花生基因轉(zhuǎn)化的優(yōu)化途徑和技術(shù)規(guī)程.取得的主要研究結(jié)果如下:1、花生組織培養(yǎng)離體再生體系的研究;2、遺傳轉(zhuǎn)化影響