日本柑桔黃龍病菌電鏡觀(guān)察及PCR檢測(cè).pdf

1、柑桔黃龍病是由韌皮部桿菌Candidatus Liberibacter引起的一種柑桔毀滅性病害,在多個(gè)國(guó)家與地區(qū)均有發(fā)生.該病在日本1988年于沖繩縣西表島初次發(fā)現(xiàn),隨后河野于1994年在沖繩本島發(fā)現(xiàn)該病并確認(rèn),近年來(lái)在日本有向北擴(kuò)展的趨勢(shì),最近在鹿兒島縣奄美大島也有發(fā)現(xiàn).自1970年Bove等用電鏡觀(guān)察到柑桔黃龍病病原以來(lái),電鏡觀(guān)察一直是作為一種重要的鑒定和診斷手段,后來(lái)基于擴(kuò)增16S rDNA特異性片斷的PCR檢測(cè)方法成了柑桔黃龍病

2、檢測(cè)的主要方法.由于柑桔黃龍病病原只存在于韌皮部篩管細(xì)胞中,而對(duì)柑桔葉片維管組織固定比較困難.該研究通過(guò)對(duì)材料細(xì)切,小心去掉木質(zhì)部部分以便于固定.由于植物組織中都含有一定的空氣,致使樹(shù)脂不能順利浸潤(rùn)細(xì)胞器,這就給材料包埋帶來(lái)困難,這可以通過(guò)在預(yù)包埋過(guò)程中處以真空處理以抽出植物組織中的空氣,以便更好包埋.該研究對(duì)日本柑桔體內(nèi)的柑桔黃龍病原菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了電鏡觀(guān)察,并與發(fā)生在其它地區(qū)的柑桔黃龍病的病原進(jìn)行了比較,結(jié)果表明柑桔黃龍病病原體存