26215.葉酸殼聚糖納米載體的制備及其靶向作用研究

1、學校代碼：10225學號：B14060學位’論文葉酸一殼聚糖納米載體的制備及其靶向作用研究指導教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：邢志華方桂珍博士學科專業(yè)：林產(chǎn)化學加工工程2014—0320論文答辯日期：201406—10東北林業(yè)大學授予學位日期：2014—06答辯委員會主席：論文評閱人：聾多厶符素大學摘要摘要殼聚糖(CTS)是一類重要的尚未高效利用的天然高分子。本文依據(jù)靜電相互作用的原理，以殼聚糖和葉酸為原料，采用離子

2、交聯(lián)法制備了葉酸殼聚糖納米粒及載藥納米粒。利用紅外光譜(IR)、激光粒度分析儀、透射電子顯微鏡(TEM)和zeta電勢表征了納米粒的化學結(jié)構(gòu)、平均粒徑、分散指數(shù)和外貌形態(tài)特征。測定了藥物的包封率、載藥率、體外釋放速率、穩(wěn)定性、體內(nèi)外抑瘤活性、器官靶向性、平均滯留時間。本研究不僅改善了葉酸殼聚糖納米粒的制備方法，而且使其載藥范圍擴大，所得載藥納米粒既具備載藥率高、包封率高、穩(wěn)定性好的特點，又具有靶向緩釋的顯著特性，為殼聚糖資源的合理利用提

3、供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和技術(shù)支持。具體研究內(nèi)容及結(jié)果如下：以殼聚糖為載體、葉酸(FA)為靶向配體、三聚磷酸鈉(TPP)為聚陰離子，在水相中，利用陰陽離子間的靜電相互作用，采用離子交聯(lián)法一步合成了空白(不載藥)葉酸殼聚糖納米粒(CTSTPPFA)。紅外光譜(IR)證實葉酸與殼聚糖是以離子鍵結(jié)合的。以納米粒粒徑(小于200nm)為指標，考察了對納米粒粒徑的影響因素，得到最佳制備工藝為：在水浴55℃、滴加速度ld／s、攪拌速度900～1000r／min條

4、件下，以VmL濃度為20mg／mL的殼聚糖醋酸溶液(醋酸濃度為1％，此時pH值為395)為底液，先向其滴加V／4mL濃度為10mg／mL的葉酸氨水溶液，然后向其滴加V／10mL濃度為20mg／mL的三聚磷酸鈉溶液，滴加完畢，繼續(xù)攪拌10分鐘，得空白葉酸殼聚糖納米粒水分散體系，離心，凍干，得空白葉酸殼聚糖納米粒。在最佳制備工藝條件下，所得納米粒為球形，大小均勻，水合平均粒徑為145nm，分散指數(shù)為1019。在空白納米粒制備基礎(chǔ)上，以包封率

5、為指標，綜合考慮載藥率及粒徑大小，考察了藥物的加入方式及加入量對包封率及載藥率的影響，結(jié)果表明：對于羥基喜樹堿(HCPT)，先使HCPT與殼聚糖醋酸溶液以3：10(羥基喜樹堿：殼聚糖，w／w)比例混合。對于阿霉素(DOX)，先使DOX與TPP生成聚電解質(zhì)，然后按空白納米粒的制備方法制得載藥納米粒(HCPT／CTSTPPFA和DOX／CTSTPPFA)。所得HCPT／CTSTPPFA納米粒平均粒徑為150nm，包封率、載藥率分別為8990

6、％、1980％，體外累積釋藥率24h可達87％，其釋放規(guī)律符合Higuchi方程，納米粒表面帶正電荷，電位值為501mV，粒度穩(wěn)定性較好，放置數(shù)十天粒徑幾乎無變化。所得DOX／CTSTPPFA納米粒平均粒徑為162nm，包封率、載藥率分別為9100％、2150％，體外累積釋藥率5d可達2825％，其釋放規(guī)律符合Higuchi方程。納米粒表面帶正電荷，電位值為521mV，粒度穩(wěn)定性好，放置數(shù)十天粒徑幾乎無變化。從粒徑大小及所連接葉酸的量推