中國(guó)大豆主栽品種遺傳轉(zhuǎn)化基因型的篩選.pdf

1、大豆作為重要的植物油脂和蛋白質(zhì)來(lái)源，在人類(lèi)膳食中扮演著重要的角色。近年來(lái)，隨著種植面積的增加，商品化的轉(zhuǎn)基因大豆正占有越來(lái)越多的大豆交易市場(chǎng)。
　　受體基因型依賴(lài)是限制根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆遺傳轉(zhuǎn)化效率提高的重要因素。目前，主栽大豆品種遺傳轉(zhuǎn)化效率偏低，嚴(yán)重制約優(yōu)良轉(zhuǎn)基因材料的創(chuàng)制和品種選育效率。本實(shí)驗(yàn)以適宜我國(guó)不同地域種植的13個(gè)大豆主要栽培品種為材料，系統(tǒng)比較了其再生能力和根癌農(nóng)桿菌侵染轉(zhuǎn)化效率。分析了不同品種之間叢生芽誘導(dǎo)率與

2、芽伸長(zhǎng)率之間的關(guān)系。研究結(jié)果表明，不同品種間的再生能力和轉(zhuǎn)化效率均存在顯著差異，但農(nóng)桿菌侵染對(duì)各品種叢生芽誘導(dǎo)率的影響較小。在進(jìn)行根癌農(nóng)桿菌侵染后，經(jīng)過(guò)篩選劑篩選，各品種的芽伸長(zhǎng)率表現(xiàn)出明顯差異，從而影響到其轉(zhuǎn)化效率。研究中優(yōu)選到4個(gè)轉(zhuǎn)化效率較高的中國(guó)主栽大豆品種，中黃42和中黃39適宜于黃淮海等我國(guó)中部地區(qū)種植，桂夏3號(hào)適宜于在南方大豆區(qū)種植，疆莫豆1號(hào)適宜于東北地區(qū)，其中高蛋白品種“中黃42”的轉(zhuǎn)化效率可達(dá)4.07％，為優(yōu)良轉(zhuǎn)基因大

3、豆材料的創(chuàng)制提供了更為理想的受體材料。
　　目前，在轉(zhuǎn)化過(guò)程中為了便于篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)化植株，通常會(huì)使用篩選標(biāo)記基因。然而，由此所帶來(lái)的一些可能存在的潛在風(fēng)險(xiǎn)，引起了比較大的爭(zhēng)議。由于植物缺乏利用亞磷酸鹽的基因，所以植物不能利用亞磷酸鹽。本研究利用亞磷酸鹽脫氫酶基因(ptxD)和亞磷酸鹽組成的篩選系統(tǒng)，用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性植株的篩選。結(jié)果表明，此篩選系統(tǒng)雖然具有一定的篩選效果，但是篩選效率較低，并不能很好的將陽(yáng)性植株與非陽(yáng)