油菜甘油-3-磷酸脫氫酶基因的克隆及功能研究.pdf

1、C L O N I N G A N D F U N C T I O N A L R E S E A R C HO FG L y C E R O L ．3 ．P H O S P H A T ED E H Y D R O G E N A S EG E N E F R O M 刪．孓5 1 配4 腳嬲L ．B YZ h a n g C h a oA T h e s i sS u b m i t t e d t oN a n j i n g A

2、 g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t yI nP a r t i a lF u l f i l l m e n t o f t h e R e q u i r e m e n t sF o r T h e M a s t e r D e g r e e o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s一● 'S u p e r v i s e dB

3、yP r o f e s s o r Q i C u n k o uC o m p l e t e d i nJ u n e ，2 0 1 2目 錄目 錄摘 要?????????????????????????????????????????????????．．IA B S l R A C T ??????????????????????????????????????????????一ⅡI符號及縮略語?????????????????

4、??????????????????V第一章緒論??????????????????????????????????一11 ．1 植物油脂合成相關(guān)酶基因的研究進展?????????????????????21 ．1 ．1 光合作用相關(guān)酶基因的研究??????????????????????31 ．1 ．2 呼吸作用過程相關(guān)酶基因的研究????????????????????．31 ．1 ．3 脂肪酸合成途徑的相關(guān)酶基因的研究??????

5、????????????．61 ．1 ．4 K e n n e d y 途徑三酰甘油酯( T A G s ) 的組裝過程相關(guān)酶基因的研究???????．81 ．1 ．5 轉(zhuǎn)錄因子的研究???????????????????????????81 ．2 甘油．3 ．磷酸脫氫酶在油脂生物合成過程中的作用???????????????．1 01 ．3 本研究的目的和意義???????????????????????????．1 1第二章油菜甘油

6、．3 ．磷酸脫氫酶基因的克隆及序列分析????????????????．．1 32 ．1 材料和方法???????????????????????????????．1 32 ．1 ．1 試劑及材料????????????????????????????一1 32 ．1 ．2 油菜總R N A 提取及反轉(zhuǎn)錄??????????????????????1 32 ．1 ．4 引物設(shè)計及合成??????????????????????????．

7、．1 62 ．1 ．5 目的基因的P C R 擴增、純化、克隆及測序???????????????．1 62 ．1 ．6 基因序列分析???????????????????????????一1 72 ．2 結(jié)果和分析???????????????????????????????．1 82 ．2 ．1 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因的c D N A 擴增???????????????．．1 82 ．2 ．2 測序結(jié)果的聚類分析??????

8、??????????????????～1 82 ．2 ．3 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因基因組D N A 的擴增?????????????2 02 - 2 ．4 甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因的核苷酸序列編碼氨基酸序列的預(yù)測???????．．2 22 ．2 ．5 甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因編碼的氨基酸序列分析?????????????一2 82 ．3 討論??????????????????????????????????．2 92 ．3

9、 ．1 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因兩個拷貝的克隆??????????????．．2 92 ．3 , 2 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因編碼區(qū)全長序列的獲得???????????一2 92 ．3 ．3 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因的序列分析????????????????一3 32 ．3 ．4 甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因編碼的氨基酸序列分析?????????????．．3 3第三章 油菜甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因的表達分析?????

10、??????????????．．3 53 ．1 甘油．3 ．磷酸脫氫酶基因在油菜中的組織表達分析???????????????．3 53 ．1 ．1 材料和方法???????????????????????????．?．3 53 ．1 ．2 結(jié)果與分析????????????????????????????．．3 73 ．1 ．2 ．1 標準曲線分析?????????????????????????3 73 ．1 ．2 ．2 甘油．3