魔芋種質(zhì)資源形態(tài)多樣性與ISSR分析.pdf

1、魔芋是單子葉植物綱(Monocotyledoeae)天南星科(Araceae)魔芋屬(AmorphophallusBlume)多年生草本植物，主要分布于亞洲印度、中南半島和云南為主的中國南部及東南亞。我國已發(fā)現(xiàn)并命名的有21種，我國特有9種，主要分布于秦嶺以南各省的山區(qū)和高原。本研究對(duì)已收集到的國內(nèi)外各種魔芋種質(zhì)資源，進(jìn)行了資源整理、性狀分類、形態(tài)鑒定和ISSR標(biāo)記研究，探討它們的親緣關(guān)系，以明確它們的分類地位，并在此基礎(chǔ)上初步制定出魔

2、芋植物的基本描述規(guī)范及術(shù)語。為我國魔芋種質(zhì)資源的保存、保護(hù)與利用提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　 1、首次對(duì)國內(nèi)外收集的79魔芋資源整理、性狀分類，通過性狀鑒定，已鑒定出的魔芋資源有64個(gè)，未鑒定出的有15個(gè)材料。采用形態(tài)鑒定的方法對(duì)供試的試驗(yàn)材料進(jìn)行分析，對(duì)形態(tài)性狀進(jìn)行Q型聚類分析，為方便分析，在樹系圖中標(biāo)注等級(jí)結(jié)合線，當(dāng)?shù)燃?jí)結(jié)合線L(D=11.00)把79個(gè)魔芋材料分為6類。
　　 2、通過對(duì)魔芋種質(zhì)ISSR反應(yīng)體

3、系進(jìn)行優(yōu)化分析，并對(duì)各個(gè)引物的退伙溫度以及PCR擴(kuò)增的循環(huán)次數(shù)進(jìn)行梯度篩選，最終確立了適合魔芋植物的ISSR擴(kuò)增反應(yīng)體系和PCR擴(kuò)增參數(shù)：在25ulISSR擴(kuò)增反應(yīng)體系中，含1ul的模板DNA，200 umol/L的dNTP，1.5U/25ul的TapDNA聚合酶，0.5umol/L引物，2.5ulMgCl2，2.5u110×buffer緩沖液及ddH2O16.7ul。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min，94℃變性1min，50-5

4、5℃(各引物退火溫度不同)退火1min，72℃復(fù)性70s，循環(huán)40次；最后72℃延伸10min，4℃保存。利用優(yōu)化的反應(yīng)體系，對(duì)49份魔芋種質(zhì)資源進(jìn)行ISSR-PCR擴(kuò)增，各種質(zhì)之間相似系數(shù)介于0.68-1.00之間，表明魔芋材料之間的遺傳差異不大。當(dāng)遺傳相似性水平取D=0.80時(shí)，供試的49個(gè)魔芋材料明顯聚為5類。
　　 3、通過對(duì)白魔芋、花魔芋、西盟魔芋、珠芽魔芋和材料64的球莖含水量、葡甘聚糖含量、果肉顏色、球莖剖面質(zhì)地及

5、其魔芋片烘后顏色的測定和觀察，得出白魔芋和花魔芋球莖含水量高、葡甘聚糖含量高、果肉顏色比較白、球莖剖面質(zhì)地較細(xì)及其魔芋片烘后顏色也比較好，故白魔芋和花魔芋的綜合品質(zhì)最好；西盟魔芋次之；材料64的綜合品質(zhì)最差。
　　 4、首次詳細(xì)地對(duì)四種魔芋花器觀察分析，花魔芋開花最早、花期短，滇魔芋與白魔芋次之，西盟魔芋最晚、花期最長。通過對(duì)魔芋附屬器氣味的研究發(fā)現(xiàn)，滇魔芋附屬器散發(fā)的氣味為濃香且吸引蜜蜂授粉。通過對(duì)魔芋通過對(duì)魔芋花器的形態(tài)性狀

6、的比較分析，結(jié)果表明佛焰苞形狀、肉穗花序/佛焰苞、附屬器形狀、有無中性器官、附屬器散發(fā)的氣味及成熟期果實(shí)顏色等幾個(gè)形態(tài)性狀種間的差異大；魔芋花器性狀種內(nèi)表現(xiàn)較為穩(wěn)定，僅花序柄的顏色和斑紋以及附屬器顏色有一定差異。
　　 5、參照我國現(xiàn)有魔芋資源的性狀描述，結(jié)合對(duì)己收集資源的性狀觀察，首次初步建立了魔芋資源的基本描述規(guī)范和術(shù)語；并為制定魔芋資源的DUS測試指南提供理論依據(jù)。魔芋種質(zhì)資源的測試性狀共有33個(gè)，可分為必測性狀和輔助性狀