丹參種質多成分評價及丹參四個關鍵酶基因不同組織表達分析.pdf

1、本論文包括兩部分內(nèi)容：(1)建立了同時對丹參中的2個脂溶性成分和3個水溶性成分進行含量測定的簡單準確的高效液相色譜方法，運用該方法分析了丹參11個無性系材料中5種活性成分的含量，比較了丹參木質部和皮部、不同根徑粗細以及不同根色中這5種成分的含量；(2)運用熒光定量PCR法對丹參酮類生物合成途徑中的SmAACT、SmDXR、SmHMGR和SmCPS四個基因在丹參不同器官中的表達進行了分析。
　　 主要研究內(nèi)容：①綜述了丹參的化學成

2、分和丹參酮類化合物生物合成途徑關鍵酶基因的研究現(xiàn)狀；②建立了同時測定2種脂溶性成分和3種水溶性成分的HPLC方法，所建方法重復性、精密度和穩(wěn)定性良好；③對不同產(chǎn)地、不同種質丹參進行品質分析；④對丹參不同部位、不同根莖粗細以及不同根色進行研究；⑤通過熒光定量PCR對SmAACT、SmHMGR、SmDXR和SmCPS4個基因的表達進行研究。
　　 研究結果表明：丹參無性系材料中脂溶性成分和水溶性成分含量有較大差別，江蘇野生(DC00

3、3)、河南野生(DC004)和河南禹州(DC007)三個地區(qū)樣品水溶性總含量比較高；河南禹州(DC007)樣品脂溶性成分總含量最高，對數(shù)據(jù)進行方差分析結果顯示，不同無性系材料丹參素、丹酚酸B和丹參酮ⅡA的含量達到顯著性差異。DC003、DC004、DC007這三個品系可以作為原始材料來進行雜交以篩選出水溶性和脂溶性成分均較高的丹參種質；對丹參不同部位、不同根莖粗細以及不同根色的研究結果顯示：皮部中丹參素、丹酚酸B、隱丹參酮、丹參酮ⅡA含

4、量均高于木質部；丹參根直徑越細，隱丹參酮和丹參酮ⅡA含量越高，但丹酚酸B含量越低，而原兒茶醛的含量在蘆頭中含量最高；丹參根粉末顏色越趨近紅色，而且顏色越深，其脂溶性成分含量就越高，水溶性成分含量也較高。另外從4個基因的表達結果推測SmCPS在丹參酮類化合物生物合成途徑中起調(diào)控作用。
　　 本文建立了同時測定丹參中的3種水溶性成分和2種脂溶性成分的方法，為多組分評價不同來源丹參藥材質量提供了一種快速方法。應用該方法對丹參不同種質不