抗禽傳染性法氏囊病毒卵黃抗體的研制及應(yīng)用.pdf

1、高免卵黃抗體近年來在我國畜牧業(yè)生產(chǎn)中得到了廣泛應(yīng)用,并取得了較好的療效。但臨床上使用的粗制卵黃抗體去脂不夠徹底,其含有大量磷脂大分子等結(jié)構(gòu)物質(zhì),容易堵塞注射器,注射后難吸收,有時還會引起腫脹、出血、壞死甚至嚴(yán)重的過敏反應(yīng),這些缺陷嚴(yán)重限制了卵黃抗體的大規(guī)模臨床應(yīng)用。本研究以抗禽傳染性法氏囊病毒卵黃抗體為試驗(yàn)對象,對卵黃抗體進(jìn)行母源抗體的提高和脫脂的處理,研究出了既適合規(guī)?；a(chǎn)需要又符合新獸藥生物制品申請標(biāo)準(zhǔn)的卵黃抗體生產(chǎn)工藝。

2、　　 本試驗(yàn)分別以4種不同的免疫原對蛋雞進(jìn)行免疫。Ⅰ:雞傳染性法氏囊病毒油佐劑雞胚組織滅活苗；Ⅱ:雞傳染性法氏囊病毒油佐劑囊毒組織滅活苗；Ⅲ:雞傳染性法氏囊病毒VP2基因工程苗；Ⅳ:雞傳染性法氏囊病毒VP2和囊毒等比例混合使用苗。蛋雞免疫該抗原后可制備出相應(yīng)的高效價的卵黃抗體,對抗體動態(tài)變化規(guī)律觀測結(jié)果發(fā)現(xiàn),雞血清抗體IgG與卵黃抗體IgY動態(tài)變化規(guī)律基本一致,且發(fā)現(xiàn)VP2和囊毒在同時免疫時有協(xié)同免疫作用。
　　 通過試驗(yàn)條件

3、的優(yōu)化,建立了四種卵黃抗體的脫脂方法:聚乙二醇(PEG)法、泊洛沙姆-辛酸法、水稀釋法、水-辛酸法,使粗制的卵黃抗體經(jīng)過處理后可以獲得效價和性狀穩(wěn)定的脫脂抗體液。但通過綜合比較,本試驗(yàn)最終確定由泊洛沙姆作為脂肪沉淀劑:泊洛沙姆濃度1.2％,辛酸濃度0.2％,不離心自然沉降后紗布過濾,其制得的抗體效價損失少,物理性狀好。
　　 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明,抗禽傳染性法氏囊病毒卵黃抗體(IBDV-IgY)在堿性、中性和弱酸性pH范圍內(nèi)都能保

4、持較好的穩(wěn)定性,而在強(qiáng)酸性范圍內(nèi)(pH3),抗體活性降低。37℃保存時,穩(wěn)定性較差；-20℃和4℃保存時比較穩(wěn)定,可保持6個月不變；在室溫保存時6個月內(nèi)基本沒有變化。在70℃以上加熱時穩(wěn)定性差。胰酶消化8小時后,抗體活性保留率為50％。
　　 經(jīng)過試驗(yàn),找到了抗體液的最適用量和最佳治療途徑。禽傳染性法氏囊病毒卵黃抗體的動物攻毒保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果表明,攻毒后24小時內(nèi),攻毒雞每天肌肉注射1次效價為1:32的卵黃抗體1ml,連用3天,保護(hù)