金針菇菌種質(zhì)量檢測技術(shù)研究.pdf

1、菌種是食用菌產(chǎn)業(yè)的重要生產(chǎn)資料之一,其質(zhì)量優(yōu)劣直接關(guān)系到食用菌產(chǎn)業(yè)能否良性發(fā)展。本研究F0025、F0030、F0305三個金針菇菌株為材料,從純度、品種、活力三個方面進行研究,分別建立了一套比較完整的金針菇菌種質(zhì)量檢測技術(shù)。主要結(jié)果如下:
　　 1.純度檢測
　　 以三個菌種的菌絲為材料,分別從細菌、霉菌孢子、內(nèi)生細菌、病毒四個方面檢測。細菌檢測采用平板劃線法、平板涂布法、液體培養(yǎng)和煮沸法快速提取DNAPCR擴增,通過

2、人為控制,每種方法都能檢測到一個最低限度。霉菌孢子檢測采用平板涂布法,最低能檢測到每克菌種中有100個孢子。內(nèi)生細菌的檢測,以原生質(zhì)體爆破法和抗生素處理法進行檢驗,最終都未檢測到內(nèi)生細菌。病毒的檢測采用dsRNA技術(shù)和酶切驗證,結(jié)果顯示陽性對照中檢測到了dsRNA,而其他三種金針菇中均未檢測到,說明此方法能夠用于食用菌病毒的檢測,以及實驗采用的三種金針菇都未感染病毒。
　　 2.品種鑒別
　　 本文從種間和種內(nèi)兩個層次對

3、金針菇品種進行鑒別。通過ITS-RFLP技術(shù)能將金針菇與其他種食用菌鑒別開來。再用DNA分子標記技術(shù)進行金針菇種內(nèi)的鑒別?？紤]到SRAP與其他的分子標記相比具有簡便、穩(wěn)定、多態(tài)性高等特點,本實驗以三種金針菇SRAP擴增,結(jié)果篩選了22對SRAP引物,獲得了33個多態(tài)性片段,鑒別準確率在99.99％以上。
　　 3.菌種活力
　　 通過制備不同菌齡的金針菇菌種,測定了幾個與菌種老化相關(guān)的生理生化指標,結(jié)果表明:CMC酶、木