蘿卜RsARGOS基因的克隆及表達(dá)分析.pdf

1、在植物生活周期完成和形態(tài)建成的過程中，通過分生組織的活動，會穩(wěn)定地形成一些形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能均有明顯不同的器官。器官大小的不同是不同種類植物的相同器官之間最明顯的區(qū)別。由于絕大多數(shù)植物固定生長，器官大小經(jīng)常受到外界環(huán)境信號的影響。然而，大量證據(jù)表明植物器官的大小仍然主要是受到內(nèi)部發(fā)育信號的控制。隨著遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們已經(jīng)能夠深入研究控制植物器官大小的分子機(jī)制。通過對影響擬南芥器官大小的基因的研究與分析，人們分離出了一系列控

2、制器官大小的基因。由于蘿卜和擬南芥同屬于十字花科，所以利用擬南芥器官大小的控制方面的知識來研究蘿卜器官大小的控制具有非常重要的理論意義和應(yīng)用價值。本研究從蘿卜中分離了擬南芥ARGOS基因的同源基因RsARGOS1和RsARGOS2，并對其表達(dá)模式進(jìn)行了分析。主要結(jié)果如下:
　　 1.RsARGOS基因的分離和生物學(xué)分析
　　 從蘿卜葉片中分離出ARGOS基因兩個同源基因，RsARGOS1和RsARGOS2。RsARGOS

3、1基因cDNA長為402bp，編碼134個氨基酸。RsARGOS2基因cDNA長為330bp,編碼109個氨基酸序列。分析表明RsARGOS1和RsARGOS2氨基酸序列與擬南芥ARGOS氨基酸序列同源，是擬南芥ARGOS基因的同源基因。RsARGOS1和RsARGOS2基因所編碼的蛋白質(zhì)具有各種二級結(jié)構(gòu)，包括自由卷曲，伸展片斷和α-螺旋。氨基酸的組成中亮氨酸含量最高，可能與該基因參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。
　　 2.RsARGOS基因

4、的表達(dá)模式分析
　　 通過熒光定量PCR技術(shù)分析，RsARGOS1基因在所有器官中均表達(dá)，其中花序軸中的表達(dá)量最高，其次是花蕾，葉中的表達(dá)量最低.RsARGOS2基因在葉中的表達(dá)量最高，其次是花蕾，花序軸中的表達(dá)量最低。這些結(jié)果表明該基因在不同的器官中表達(dá)水平不同。
　　 RsARGOS1和RsARGOS2基因在相同的器官的表達(dá)有明顯差異，而且RsARGOS2基因的表達(dá)量差異要高于RsARGOS1基因。
　　 在

5、幼嫩的營養(yǎng)器官中，RsARGOS2基因在較大品種中的表達(dá)量高于較小品種中的表達(dá)量。
　　 3.RsARGOS基因表達(dá)受到激素的調(diào)節(jié)
　　 蘿卜幼苗生長10天，噴施NAA，6-BA和ABA后取葉提取RNA，熒光定量PCR分析，RsARGOS2基因的表達(dá)量在噴施NAA后增高，六小時左右達(dá)到頂峰，噴施生長素的表達(dá)量也在六小時達(dá)到頂峰，但增高量不明顯，噴施ABA影響很小。RsARGOS1基因的表達(dá)量在噴施6-BA后明顯增高，六小