Ran GTPase-myosin蛋白復(fù)合體在對(duì)蝦抗病毒細(xì)胞吞噬中的作用.pdf

1、Ran GTPase蛋白是屬于小G蛋白超家族的一類成員，主要分布于細(xì)胞核內(nèi)，這類蛋白已經(jīng)被廣泛證明參與到細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)間的物質(zhì)運(yùn)輸系統(tǒng)中。然而，Ran GTPase蛋白在免疫系統(tǒng)中的作用卻仍然不清楚。 我們的研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)蝦Ran GTPase(命名為PjRan)在抗病蝦中的轉(zhuǎn)錄量和表達(dá)量相對(duì)于正常蝦(非抗病蝦)的表達(dá)量顯著增高，暗示PjRan蛋白可能參與到對(duì)蝦對(duì)抗病毒感染的先天性免疫系統(tǒng)中。基于蛋白間相互作用的研究，我們發(fā)現(xiàn)Pj

2、Ran蛋白可以與myosin蛋白相互作用并形成蛋白復(fù)合體，由于myosin蛋白可通過actin而參與細(xì)胞吞噬過程，因此PjRan-myosin蛋白復(fù)合體可能與吞噬有關(guān)。為了了解PjRan蛋白在對(duì)蝦細(xì)胞吞噬中的作用，一方面采用RNA干擾技術(shù)敲低PjRan基因的表達(dá)，檢測(cè)對(duì)蝦血細(xì)胞吞噬的變化；另一方面采用PjRan過量表達(dá)分析，研究其對(duì)細(xì)胞吞噬的影響。結(jié)果表明，通過RNA干擾技術(shù)抑制PjRan基因的表達(dá)后，對(duì)蝦血細(xì)胞的吞噬作用顯著下降；相反

3、，PjRan基因表達(dá)量的增加使對(duì)蝦血細(xì)胞的吞噬活性顯著增強(qiáng)。研究表明，PjRan基因的沉默導(dǎo)致對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)的拷貝數(shù)顯著增加，而PjRan基因的過量表達(dá)則導(dǎo)致WSSV的拷貝數(shù)顯著降低。以上的研究結(jié)果表明，PjRan蛋白能通過調(diào)控對(duì)蝦血細(xì)胞的吞噬過程從而參與對(duì)蝦的抗病毒免疫。為了進(jìn)一步了解PjRan-myosin蛋白復(fù)合體調(diào)控吞噬過程，我們初步測(cè)定了PjRan蛋白與myosin蛋白之間酶活的相互影響，并采用熒光標(biāo)記技術(shù)對(duì)P